细胞凋亡是机体维持内环境稳定的一个必不可少的步骤,机体通过内源性线粒体通路,内质网通路和外源性死亡受体通路介导正常细胞凋亡信号转导,同时诱导或抑制多种肿瘤细胞凋亡。线粒体膜表面表达Bc L家族蛋白,在调控细胞凋亡中发挥最关键作用,Y.Wei等研究发现用Borax可下调Bc L-2蛋白表达,促进HepG2细胞的凋亡;棉酚通过与Bc L-2Epigenetics抑制剂和Bc L-XL结合,促进B淋巴细胞瘤和非小细胞肺癌的凋亡;洋槐儿茶和去氢鸦胆子苦素B增加Bax/Bc L-2的比例,促进乳腺癌细胞MCF-7及肺癌细胞A549和NCI-H292的凋亡。P53是一种肿瘤抑癌基因,研究表明Borax也可以通过上调P53的表达促进HepG2细胞凋亡;Tiina A.Lantto研究发现松子Selleck BIRB796提取物可促进P53从细胞质转移到细胞核,诱导人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡;Gaillardin通过上调P53的表达或促进Bax的表达抑制乳腺癌细胞MCF-7的增殖。CHOP是调节内质网应激的一个重要的转录因子,Tang ZH等发现LCA通过激活CHOP诱导人非小细胞肺癌的凋亡;新发现的CHOP激活因子LGH00不168通过激活CHOP肺癌细胞A549产生细胞毒性,加速了肿瘤细胞凋亡的进程。JNK是促细胞分裂原(MAPK)家族蛋白中的一种,JNK通过自身磷酸化和协同死亡受体信号通路共同促进肝癌细胞凋亡;研究发现用SIRT3可增强肝癌细胞中JNK的活性,增强肿瘤细胞凋亡能力。近来研究发现DHA通过增加ERK1/2,JNK1/2和p38MAPK磷酸化下调Bc L-2/Bax水平,促进胃癌细胞BGC-823凋亡。

结果(1)HO-1在具有高侵袭转移能力的肝癌细胞系中(Bel7402,MHCC-97L,MHCC-97H,和HCC-LM3)高表达,而在低侵袭转移能力的肝癌细胞系中相对的低表达。敲除HO-1和敲减HO-1后都表现出抑制肝癌细胞的体外增殖能力和皮下成瘤能力,而过表达HO-1能增强肝癌细胞的体外增殖能力和皮下成瘤能力。流式细胞检测显示在肝癌细胞敲除HO-Dactolisib1和敲减HO-1后增加处于G1的细胞量,减少处于S期的细胞量,引起肿瘤细胞的G1期阻滞,而过表达HO-1能够正向调控细胞周期。(2)敲除和敲减HO-1后都变现出明显减弱肝癌细胞的体外迁移能力、侵袭能力,而过表达HO-1能够增强肝癌细胞的体外迁移能力、侵袭能力。尾静脉注射肝癌细胞肺转移模型结果显示敲除或者敲减HO-1后明显减弱A-1210477研究购买肝癌肺转移的能力,而过表达HO-1能够增强肝癌细胞肺转移的能力。结论HO-1能够促进肝癌细胞的增殖、肿瘤形成、迁移、侵袭、肺转移。目的为了探讨HO-1在肝癌中调控肝癌恶性生物学行为的机制,我们以HO-1为诱饵应用免疫共沉淀和质谱联用的方法筛选其相互作用的蛋白。目的在于在发现可能影响或辅助HO-1功能发挥的新分子。结果我们筛选CB-839核磁到了与HO-1相互作用的蛋白14-3-3ζ,本部分将围绕4-3-3和HO-1相互作用调控肝癌细胞恶性进展的机制研究为主旨,通过以下三节来介绍第一节(1)14-3-3ζ与HO-1相互作用的验证。第二节(2)14-3-3ζ可以通过抑制HO-1的泛素化降解来维持其蛋白稳定性。第三节(3)HO-1参与了14-3-3ζ介导的肝癌细胞增殖与侵袭。方法第一节(1)免疫共沉淀和质谱联用去筛选可能与HO-1相互作用的蛋白。

IκBα具有抑制乳腺癌细胞增殖侵袭,解除或缓解乳腺癌细胞治疗耐受,促进乳腺癌细胞的凋亡,可能成为乳腺癌治疗中的靶点或指示分子。
目的探讨三阴性乳腺癌(TNBC)组织中PD-L1/PD-1轴的表达以及肿瘤浸润性淋巴细胞(TILs)与临床病理特征和预后的关系。方法选取2016年1月至2017年8月我院病理科保存的132例石蜡包埋的女性TNBC组织,采用HE染不要色分析TILs浸润密度,采用免疫组化染色和免疫组织荧光双染色技术检测PD-1、PD-L1在组织中的表达和TILs表型,并探讨PD-L1~+CD4~+TILs、PD-L1~-CD8~+TILs表达与TNBC临床病理特征和总生存(OS)的关系。结果 PD-1主要分布于TILs的细胞膜和细胞质中,阳性表达率为44.70%(59/132),而什么PD-L1主要分布于肿瘤细胞和TILs的细胞膜和细胞质中,阳性表达率为58.33%(77/132)。TNBC组织中PD-L1表达与CD4~+TILs、CD8~+TILs均有关(P<0.05)。PD-L1~+CD4~+TILs表达率为86.10%(60/72),与肿瘤直径、TNM分期、淋巴管浸润有关(P<0.05); PD-L1~-CDSelleck GSK1210151A8~+TILs表达率为69.12%(47/68),与肿瘤直径、组织学分级、TNM分期、淋巴管浸润和淋巴结转移有关(P<0.05)。不同PD-L1表达的TILs浸润表型与患者OS无关(χ~2=0.796,P=0.850;χ~2=3.733,P=0.292),多因素Cox风险比例回归模型分析,PD-L1~-CD8~+TILs浸润是影响TNBC患者OS的独立保护因素(HR=0.853,95%CI=0.659～0.998)。

每两天测量肿瘤大小,记录。14天后处死小鼠,测小鼠和瘤体重量。计算肿瘤抑制率、瘤子生长延迟时间和增敏系数(EF)。肿瘤组织制作石蜡切片行免疫组化染色,检测CD31、VEGFA、NF-κB p65、Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果理论研究原发性肝癌形成的病机复杂,湿热毒邪内侵为肝癌发病的主要病理因素,故而AR-13324DMSO溶解度治疗以祛湿解毒为本,清热是肝癌祛湿解毒之一途。然正气存内,邪不可干,究其本是正气亏虚,导致邪气—癌毒的形成。加之已形成的癌毒自身生长需要能量,消耗人体的气血。目前肝癌的西医治疗方法耗气伤阴,如肝癌放疗后的症状属放射病,属于“火邪”、“热毒”,而“火邪”、“热毒”属于阳邪,具有温热selleckchem的特点,易耗伤津液,故应该重视益气养阴。实验研究2.5%、5%、10%、20%、40%复方红豆杉含药血清均明显降低了肝癌细胞Smmc7721和Bel7402的存活率(P<0.0001),IC50分别为(8.938±0.444)%和(7.948±0.190)%复方红豆杉含药血清。复MAPK 抑制剂方红豆杉含药血清明显抑制了肝癌细胞Smmc7721和Bel7402的迁移(P<0.0001)和侵袭(P<0.05),提高了凋亡率(P<0.01)。复方红豆杉含药血清处理后明显抑制了HUVEC的体外小管生成和肝癌细胞的体外拟态血管形成(P<0.0001)。复方红豆杉含药血清使肝癌细胞Smmc7721和Bel7402的细胞周期在G2/M期阻滞(P<0.05)。

①生存状态造模小鼠均出现食欲不佳,精神萎靡,喜静恶动,皮肤粗糙,皮肤皱褶增多等现象,空白对照组小鼠体重上升。②实验第30天时小鼠体重(g)模型组、中药组、化疗组、联合组、空白组体重分别为14.50±1.17、15.66±2.35、15.11±3.65、17.08±1.84、19.79±0.38。模型组体重下降最显著,中药+化疗组的体重下降较缓(P<0.05)。③外周血白细胞INCB28060计数(×109/L)造模组、中药组、化疗组、联合组、空白组白细胞计数分别为9.33±2.20、6.55±2.26、4.09±2.70、6.67±2.04、2.68±0.28,造模组小鼠外周血白细胞明显高于其他几组,(P<0.05)。④CD33+CD117+比例(%)骨髓模型组、中药组、化疗组、联合组、空白组分别为47.75±11.76、40.14±BMS-754807生产商11.62、26.43±4.09、15.36±5.58、0.75±0.29;外周血模型组、中药组、化疗组、联合组分别为18.89±2.52、10.52±2.28、3.85±0.24、2.13±0.61,联合组CD33+CD117+比例最低(P<0.01)。⑤肝脾重量(g)模型组、中药组、化疗组、联合组、空白组肝脏重量分别为1.167574±0.15phosphatase inhibitor library3007、0.992438±0.041468、1.059987±0.403035、1.096196±0.192931、1.094403±0.069661,P>0 05;模型组、中药组、化疗组、联合组、空白组脾脏重量分别为0.25568±0.030474、0.182473±0.007355、0.21829±0.0.013861、0.21337±0.008098、0.156837±0.009639,中药组脾脏重量最低(P<0.05)。

(2)；鞘内注射氯胺酮不影响UCHL1/ubiquitin的表达,但是可以抑制胫骨癌痛大鼠脊髓背角小胶质细胞和星形胶质细胞的活化,提示氯胺酮可以通过抑制胶质细胞激活(而非抑制脊髓UCHL1/ubiquitin),进而发挥镇痛作用。
目的观察艾芬地尔重复鞘内注射对小鼠骨癌痛的影响。方法 96只雄性C3H/HAZD4547小鼠eJ小鼠随机分为肿瘤给药组(T组)、肿瘤对照组(C组)和假手术组(S组)。将含2 ×105个纤维肉瘤NCTC2472细胞的最小必需培养基(α-MEM)注射到小鼠右侧股骨远端骨髓腔内,制作骨癌痛模型。假手术组注入不含肿瘤细胞的α-MEM。T组在术后第14天开始,鞘内注射艾芬地尔5 μl BYL719DMSO溶解度(10 μg),每天1次,连续3天。C组和S组在相同时间点分别给予相同体积的溶媒。各组于接种前l天,接种后第3天、第5天、第7天、第10天、第14天、第17天、第19天和第23天检测痛行为学指标,包括小鼠的自发抬足次数、机械性缩足反射阈值(PWMT)和热缩足反射潜伏期(PWTL)。按照OTX015供应商分组在相应时间点处死小鼠,用Western-blotting方法检测脊髓腰膨大NR2B蛋白表达水平。结果肿瘤细胞接种后第14天,和S组及术前基础值相比,T组小鼠自发性抬足[(12.88±1.64) 次]显著增加,PWMT(0.39±0.17)g和PWTL(11.59±1.67)s明显下降(P0.05)。脊髓NR2B蛋白(2.12±0.13)显著增加(P0.05)。

鸡传染性法氏囊病(Infectious Bursal Disease, IBD)是由传染性法氏囊病病毒(Infectious Bursal Disease Virus,IBDV)引起的禽的一种急性高度接触性传染病,该病以法氏囊损伤和免疫抑制为特征。IBDV的基因组包含3个开放阅读框,编码VP1、VP2、VP3、VP4、VP5共5种病毒蛋白。其中,确认细节结构蛋白VP2是病毒粒子衣壳结构的主要成分,它影响宿主细胞嗜性、病毒遗传变异以及诱发细胞自噬。VP2是首个被证实可以引起宿主细胞以及多种哺乳动物细胞凋亡的IBDV相关蛋白,长期以来一直引起关注。然而,目前对于VP2诱导细胞凋亡的分子机理仍然不清楚。本研究重点探索VP2诱导细胞凋亡的分子机理,寻找IBDV VP2蛋白在宿主细胞凋亡selleck screening library信号通路中所作用的靶蛋白,探索VP2诱导细胞凋亡的分子机制。利用酵母双杂交技术,以VP2为诱饵蛋白,从法氏囊cDNA文库中筛选到了与VP2结合的宿主抗凋亡蛋白oral cancer overexpressed 1 (ORAOV1)。应用免疫共沉淀及激光共聚焦技术进一步确证了 VP2与ORAOV1之间的互作关系。此外,利用RNA干Androgen Receptor Antagonist扰技术沉默ORAOV1的表达后发现,降低ORAOV1蛋白的表达水平能够直接引起Hela细胞或者DF-1细胞凋亡,从而证实ORAOV1的功能与细胞凋亡有关,是一种抗细胞凋亡的分子。然后,我们发现VP2转染或者IBDV感染能够引起ORAOV1蛋白降解并且引起明显的细胞凋亡,并检测到引起细胞凋亡的关键蛋白酶Caspase-3及其底物PARP的剪切。与此同时,VP2诱导细胞凋亡程度与ORAOV1蛋白减少呈正相关。

5.正常对照组正常卵裂率明显高于安慰剂组,差异有统计学意义(P<0.05);中药治疗组与安慰剂组比较差异虽无统计学意义(P>0.05),但正常卵裂率有升高的趋势。(二)1.RT-PCR及Western-blot结果显示三组患者卵巢颗粒细胞上都有Mfn2蛋白的表达。正常对照组及中药治疗组颗粒细胞Mfn2 mRNA及蛋白的表达均明显高于安慰剂组,差异有统high throughput screening compounds计学意义(P<0.05);中药治疗组与正常对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。2.中药治疗组与正常对照组较安慰剂组△Ψm荧光强度比值显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);正常对照组间△Ψm荧光强度比值高于中药治疗组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论(一)在IVF-ET治疗周期,应用补肾中药二至天癸颗粒GSK1838705A半抑制浓度能改善高龄IVF-ET患者的肾气阴两虚症状,在一定程度上改善2pn受精率、优胚率及临床妊娠率,降低高龄女性早期胚胎的发育迟缓,对异常卵裂的发生有所纠正。(二)补肾中药可能是通过提高高龄肾气阴两虚型IVF患者卵泡液颗粒细胞中Mfn2的表达并提高线粒体的膜电位的表达,进而促进线粒体的融合过程,抑制ATP水平的下降,减缓线粒体膜电GSK2879552浓度位降低的速度,促进卵母细胞的正常发育,提高早期胚胎的发育潜能,从而改善高龄肾气阴两虚型IVF患者妊娠结局。
目的探究硒对氟致大鼠肾小管上皮细胞(NRK-52E细胞)线粒体膜电位改变的拮抗作用。方法实验共设4组染氟组(5mg/L和20mg/L的氟化钠)、染硒组(0.0171mg/L和0.0342mg/L的亚硒酸钠)、硒干预组(氟化钠和亚硒酸钠联合干预)和对照组,按照分组干预NRK-52E细胞48 h。

透射电镜检测线粒体超微结构改变,并进一步检测TM3细胞线粒体膜电位、ATP含量、ROS水平,线粒体生物合成相关蛋白水平、线粒体DNA拷贝数以及线粒体质量。以明确BPDE染毒对TM3细胞线粒体结构、功能以及生物合成的影响。使用PGC-1α激动剂ZLN005预处理TM3细胞,检测上述指标以明确线粒体生物合成在BPDE对细胞睾酮合成的影响中所起的作用。进一步通过激光共定位和AP26113浓度Western blot检测线粒体自噬通路相关蛋白的表达情况,分别采用自噬抑制剂3-MA和线粒体自噬诱导剂CCCP抑制或促进线粒体自噬水平,检测上述相关指标,以明确线粒体自噬在BPDE对细胞睾酮合成的影响中所发挥的作用。4.利用课题组前期开展的人群流行病学研究,分析既往数据和资料,初步探索人精子线粒体功能与精子顶体酶活性和DNA断裂指数之间的确认细节联系。在此基础上,使用CCCP体外处理人类精子,检测精子线粒体膜电位、顶体酶活性、顶体反应能力和DNA断裂指数,并检测精子内ROS水平和ATP含量,以进一步明确和验证精子线粒体功能和精液质量之间的关系。结果1.BPDE处理导致GC-2细胞ATP含量下降,并导致Cyt C释放增加以及caspase-9和caspase-3的激活。BPDE染毒造成LXH254DMSO溶解度GC-2细胞SIRT1活性降低(P<0.01),进而抑制PGC-1α去乙酰化,同时引起线粒体生物合成相关蛋白SIRT1、PGC-1α、NRF1表达水平降低,最终导致线粒体质量下降(P<0.05)。增加SIRT1表达可明显改善BPDE所致的上述线粒体生物合成的改变,并显著恢复线粒体膜电位、细胞ATP含量和Cox IV蛋白水平。上调SIRT1表达可降低胞浆Cyt C水平,并抑制caspase-9和caspase-3的活化。

通过降糖、降压、阻断肾素-血管紧张素-醛固酮系统（renin-angiotensin aldosterone system，RAAS)等方法虽可一定程度的降低血糖、血压和尿蛋白，但有时仍难以阻止DN的进展。中医药对DN的疗效肯定，但其作用机制尚未完全阐明。自噬（autophagy）是哺乳动物中一种高度保守的溶酶体降解途径，能够清除蛋白质聚集物和受G418分子量损的细胞器以维持细胞稳态。足细胞，也称为肾小球上皮细胞，是维持肾小球滤过屏障的稳态的重要组分，足细胞损伤被认为是DN发生和发展的中心环节。作为一种高度分化的细胞，足细胞在生理状态下保持着较高的自噬水平以维持其细胞稳态。在DN状态下，哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin，mTOhttps://www.selleck.cn/products/17-AAG(Geldanamycin).htmlR)、腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase，AMPK)及沉默信息调节因子1( silent information regulator 1，SIRT1)等营养信号通路以及氧化应激、内质网应激、缺氧应激等细胞内应激反应信号通路等影响足细胞自噬，最终导致了足细胞的损伤及DN的进展。近年CAL101来，调控足细胞自噬已成为DN研究的热点之一，在中医药领域也受到了广泛的关注，通过回顾和总结该领域的国内外文献后发现，中医药能够多通路、多靶点影响足细胞自噬，但研究主要集中在mTOR和AMPK两个营养感应信号通路，缺乏更全面而深入的机制研究。此外，目前的研究主要集中在中药单体和中药复方领域，缺少中药组分药和单味药物的研究，研究尚缺乏层次性。中医药对DN状态下足细胞自噬的调控机制仍需深入而系统的研究。