本系列活性最强的化合物22c,由于其明显优于SAHA的体内外抗肿瘤活性,已被作为抗癌候选药物进行临床前研究与开发。 三.以酪氨酸为骨架结构的异羟肟酸类组蛋白去乙酰化酶抑制剂的设计、合成及抗肿瘤活性研究 上述系列中设计得到的四氢异喹啉-3-羧酸系列HDACs抑制剂有效的HDACs抑酶活性和体内外抗肿瘤活性激发一般了我们对其进行进一步结构改造和优化的热情。为了考察分子柔性对活性的影响,本章采用相对柔性的酪氨酸结构片段代替四氢异喹啉-3-羧酸系列HDACs抑制剂骨架结构中的刚性四氢异喹啉-3-羧酸结构片段。设计合成的13个酪氨酸系列化合物结构经过1HNMR和HRMS确证。经查阅文献证实,所合成selleck compound的目标化合物均为新型化合物,未见文献或专利报道。 我们首先对目标化合物进行了HDAC8的抑酶活性筛选和体外人乳腺癌细胞(MDA-MB-231)、肺癌细胞(A549)和结肠癌细胞(HCT116)的抗增直活性筛选,结果表明酪氨酸系列化合物与四氢异喹啉-3-羧酸系列化合物相比,有较强的H已经DAC8抑酶活性和较弱的抗肿瘤细胞增殖活性。其中,目标化合物Q1、Q2、Q3和Q4的HDAC8抑酶活性比SAHA强10倍以上。进一步的以HeLa细胞核提取物为酶源(主要含HDAC1和HDAC2)的测试结果表明,化合物Q1-Q4的活性明显差于SAHA,这可能是该系列化合物抗肿瘤细胞增殖活性较差的原因,因为研究表明HDAC1和HDAC2的活性与肿瘤细胞增殖密切相关。

因此，TPX2基因与Aurora-A基因越来越受到医学研究者的关注，成为目前研究肿瘤的热点。 目的： 观察TPX2和Aurora-A在口腔鳞癌中的表达情况，探讨TPX2和Aurora-A在口腔鳞癌预后和治疗中的意义。 方法： 选择口腔鳞癌标本61例作为实验组，61例正常口腔黏膜为对照组。应用免疫组化SP法检测TPX2和Aurora-A蛋白表达，在显微镜下HIF 抑制剂观察阳性细胞所占百分比，并进行结果判定。 结果： 免疫组织化学染色结果显示, TPX2蛋白在正常黏膜与口腔鳞状细胞癌组织的表达率有显著性差异(P 0.05）。 结论： 1. Aurora-A在口腔鳞状细胞癌组织中的表达明显高于正常组织，并与肿瘤的恶性程度及肿瘤有无淋巴结转移具有明显相关性（P＜0.05）。但与肿瘤的大小、发生部位表观遗传化合物库临床试验、患者年龄及性别无关（P＞0.05）。Aurora-A的过高表达在口腔鳞状细胞癌的发生发展过程中可能起到重要作用。 2. TPX2在口腔鳞状细胞癌中表达率高于正常组织（P＜0.05），并且TPX2与肿瘤有无淋巴转移有着显著相关性（P＜0.05）。然而，TPX2的表达与口腔鳞状细胞癌恶性程度、肿瘤的大小、发生部位、患者年龄及性别无BTK inhibitor screening library关（P＞0.05）。由此可见，TPX2参与了口腔鳞状细胞癌的发生发展过程，并在其中发挥了重要作用。 3.在口腔鳞状细胞癌组织中Aurora-A与TPX2的表达呈正相关，在口腔鳞状细胞癌的发生发展过程中两者存在着相互促进的关系。TPX2和Aurora-A在口腔鳞癌的发生、转移过程中均具有重要的促进作用，且二者间也存在相互促进的关系。TPX2与Aurora-A的联合检测有望成为口腔鳞癌早期诊断和判断预后的分子指标。

第一部分 实验目的：胰岛素样生长因子-1受体(IGF1R)在乳腺癌的发生发展中起着重要作用,目前已成为靶向治疗新的热点方向。然而,IGF1R同预后的相关性长期以来一直存在着争议。本研究将从IGF1R基因拷贝数、基因表达和蛋白表达三个方面来全方位分析这一分子标志物与预后的关系,以期为今后的靶向治疗提供合适的指Selleck ZD6474标。 材料与方法：通过对325名原发浸润性乳腺癌患者的肿瘤标本进行包括基因拷贝数、mRNA表达和蛋白表达的全面综合分析,评估IGF1R表达情况与临床病理因素和预后的相关性。 结果：IGF1R mRNA水平不仅与蛋白表达相关,还和许多临床病理因素及预后有高度相关性。低组织学分级、腋窝淋巴可能结阴性、激素受体阳性、Her2阴性、Ki67阴性以及luminal亚型肿瘤显示高表达IGF1RmRNA.在单变量分析中,IGF1RmRNA与较好的RFS和BCSS相关；在多变量分析中,仍然是BCSS的独立预后因子。IGF1R蛋白表达在单变量分析中与延长的BCSS有关。IGF1R基因拷贝Sunitinib化学结构数与mRNA或蛋白表达无明显相关性,并且未发现有预后意义。在Luminal肿瘤亚型中,IGF1RmRNA高表达提示更好的BCSS. 结论：原发性乳腺癌中IGF1RmRNA和蛋白表达具有相关性,而IGF1RmRNA表达则可以作为预后指标。这些研究结果将为IGF1R靶向治疗提供重要信息。 第二部分 实验目的：IGF1R被认为在浸润性乳腺癌的发生及发展过程中起到重要作用。

[结果]胰岛素及胰岛素类似物可与胰岛素受体、胰岛素样生长因子受体、杂合受体结合,激活细胞内丝裂原活化蛋白激酶信号通路、磷脂酰肌醇3激酶信号通路及可能存在的其他信号通路,促使细胞有丝分裂、增殖及抗细胞凋亡,增加肿瘤生成、癌变、转移的风险。然而,胰岛素信号通路中信号分子的基因多态性却AZD8055供应商并不一定增加肿瘤风险。[结论]体外研究表明胰岛素信号通路与肿瘤风险相关。而胰岛素及其类似物在人体内环境中是否同样能增加肿瘤风险,值得更深一步的研究。
肾上腺皮质癌是发生于肾上腺皮质的恶性肿瘤[1-2],发病率远低于肾上腺良性肿瘤,每年发病率为(0.7~selleck2.0)/100万人[3],但在巴西南部儿童中发病率可达(3.4~4.2)/100万人,且最近15年来呈越来越低龄化趋势,如此异常升高的发病率可能与当地人种抑癌基因——TP53基因的高突变率有关[4]。肾上腺皮质癌的发生在年龄分布
循环肿瘤细胞(cirTalazoparib核磁culating tumor cell,CTC)零星地存在于实体瘤患者的外周血中。加强对CTC分离、体外培养以及鉴定技术的研究,可能有助于对肿瘤中新发突变进行鉴定,从而实现对患者药物敏感性变化的无创性监测。Yu等从6例ER阳性乳腺癌患者外周血中成功分离出CTC并建立了CTC细胞系。对5种CTC细胞系进行测试,其中3个可使小鼠成瘤。

目前,胃癌的主要治疗方式是手术切除,然后辅以放化疗,尽管这一治疗方式仍然行之有效,但是对胃癌转移患者却疗效不佳。因此,寻找胃癌新型早期诊断和预后评估因子仍然是一项迫在眉睫的任务。 细胞外信号分子,如致癌基因或抑癌基因,是许多学者的研究热点。作为分子标记物,p53,钙黏蛋白E (E-cadherin)和HER-2往往提示胃癌患者预后差。值得我们注意的是,各种确认细节各样的蛋白酶类,包括基质金属蛋白酶类(MMPS)和丝氨酸蛋白酶类,因其是细胞外基质物质的降解产物,往往也在胃癌发生-发展过程中发挥重要作用。 丝氨酸蛋白酶抑制剂2(SERPINE2),别称前列腺微管连接蛋白1(PN-1),是丝氨酸蛋白家族中的一员,主要负责调节凝血酶、尿激酶、血纤维蛋白溶媒和胰蛋白酶的活性。在慢性阻塞性肺疾病和小叶临床试验性肺气肿中丝氨酸蛋白酶抑制剂2作为一个敏感因子首次被发现。最近的研究表明,丝氨酸蛋白酶抑制剂2与肿瘤形成密切相关。有文献报道,丝氨酸蛋白酶抑制剂2在乳腺癌、结肠癌、口腔鳞状细胞癌等多种恶性肿瘤中呈现异常表达。此外,丝氨酸蛋白酶抑制剂2在前列腺癌中同时也是一种抑癌基因,有降低肿瘤细胞增殖和血管形成的作用。而恰恰相反,另有文献报道,丝AZD4547半抑制浓度氨酸蛋白酶抑制剂2在睾丸癌的移植物模型中有促进淋巴结转移的作用,提示其可能同时也是一个致癌基因。但是,丝氨酸蛋白酶抑制剂2在胃癌中的表达、其与胃癌患者预后的关系以及其在胃癌细胞中的生物学功能仍然鲜有报道。 本实验通过应用实时定量免疫荧光聚合酶链式反应(real-time quantitativePCR.)测定SERPINE2mRNA在243例胃癌样本中的表达,研究其表达与胃癌各临床病理参数以及患者预后的关系。

硅胶柱色谱法从补骨脂药材中分离补骨脂定并纯化,通过薄板色谱(TLC)、质谱(MS)、核磁氢谱(1H NMR)和元素分析进行鉴定,紫外比色法和HPLC进行含量分析;采用双侧卵巢摘除大鼠作为骨丢失动物模型,17β-雌二醇为阳性对照,研究香豆雌酚和补骨脂定的抗骨丢失作用,确HSP抑制剂认含异戊烯基天然产物的抗OP活性。大鼠去势1周后灌胃给药治疗,持续12周,解剖观察大鼠主要脏器是否病变,称量湿重并计算脏体指数,制作子宫石蜡切片并行HE染色;全自动生化分析仪检测大鼠尿液和血清中钙、磷及肝肾功能指标;ELISA法检测大鼠血清中SAHA HDAC订单骨形成指标BALP、BGP、PICP和骨吸收指标TRAP、CTX-I的含量;DEXA测定大鼠股骨骨密度,三点弯曲实验检测大鼠股骨的生物力学性能;Micro-CT分析大鼠股骨干骺端的骨小梁微结构特性,硬组织切片分析矿化沉积速率。体外培养实验大鼠C646浓度的BMSCs,检测细胞的成骨及成脂分化能力;提取实验大鼠骨组织中总mRNA和总蛋白,分析骨代谢相关信号通路上主要因子的表达情况。结果含异戊烯基天然产物均能刺激BMSCs和ROB增殖,提高细胞ALP活性,促进成骨相关蛋白分泌和钙化结节形成,除新补骨脂异黄酮外,其他含异戊烯基天然产物的骨保护效果明显强于其不含异戊烯基的母环形式。

正常情况下,FGFR1的生物学作用主要表现在胚胎发育、骨骼形成、血管生成、神经再生等生长发育方面,而在发生功能紊乱的情况下,其与多种恶性肿瘤的发生发展有着密切关系。导致FGFR1信号通路的失调控的最常见原因是基因改变,FGFR1基因位于染色体8p12,目前发现的两种最常见的基因异常为点突变和基因扩增。FGFR1基因扩增是肿瘤最常ABT-263见的遗传学改变之一,在乳腺癌、卵巢癌、膀胱癌及头颈鳞状细胞癌中均已被证实。在肺癌中,Weiss等首次发现FGFR1过表达与吸烟的鳞癌患者有关,提示烟草可能破坏该蛋白质的编码基因,与肺鳞癌的发生密切相关,在肺鳞癌细胞系中,肿瘤的生长存在依赖于FGFR1激活的现象,而特异性阻断这种激活后肿瘤表现为生长缓慢甚MK-1775体内至体积缩小。Schildhaus等应用FISH (fluorescence in-situ hybridization)法检测402例非小细胞肺癌组织中FGFR1的水平,其中肺鳞癌中16%为高度扩增(n=307),4%为低度扩增,而肺腺癌中未见扩增(n=100),该现象己被多个研究所证实。肺鳞状细胞癌基R428 价格因研究在世界范围内方兴未艾,但在我国仍然缺乏相应资料。在食管癌中,FGFR1基因研究较少,而且,由于欧美国家绝大多数食管癌为腺癌,而鳞状细胞癌较少,也导致了食管鳞状细胞癌一直以来缺乏有说服力的研究。尽管如此,在为数不多的相关研究中,研究者用多种方法证实了食管鳞状细胞癌中8p11-12片段的扩增,这也使得位于该片段上的FGFR1成为了深入研究的候选基因(candidate gene)。

为了更全面地了解AURKA过表达后E2F1的转录调节,我们用ChlP-chip的方法检测了全基因组水平E2F1结合启动子的状况。应用两种不同的分析工具,对E2F1转录调节的动态变化进行分析后发现：在AURKA高表达0-24小时期间,E2F1下游靶基因主要富集于EGF等信号通路,而在24-48小时,E2F1下游靶基因主要富集于VEGFEGFR抑制剂、wnt/β-catenin等信号通路,从48小时内整体变化来看,启动子与E2F1结合的基因主要集中于肿瘤发生发展相关的信号通路以及TGF-p通路等,提示AURKA高表达可能通过E2F1对细胞周期进展具有促进作用。 总之,AURKA是一个在肿瘤发生发展中起多重作用的关键癌基因。我们通过研究阐明了E2F1及其为什么两个靶基因miR-17-92和PAK7以及一些其它信号通路在AURKA的下游扮演着重要的角色,一方面为研究AURKA在肿瘤发生发展中的作用机制提供了重要信息和思路,另一方面提示这些下游效应分子也可能作为AURKA异常肿瘤的潜在治疗靶点。
第一部分：预测卡培他滨治疗转移性乳腺癌疗效和毒性的遗传标记物的研究 此网站目的：卡培他滨(希罗达)是一种细胞毒性药物,广泛用于转移性乳腺癌(Metastatic breast cancer, MBC)的治疗。该药口服后会在小肠吸收,通过3步的酶催化,最后经胸苷磷酸化酶(thymidine phosphorylase, TP)催化为氟尿嘧啶(fluorouracil,5-FU)而发挥作用。然而在卡培他滨治疗MBC,尚未发现能够有效预测该药疗效或毒性的分子标志物。

第二个方法是,联合应用ABCB1和ABCG2的特异性抑制剂和有效的抗癌药物,从而抑制ABCB1和ABCG2外排作用,增加抗癌药物渗透入脑到达病灶能力。本课题包含两部分,第一部分我们研究了五种Zeste同源物2增强子(Enhancer of Zeste Homolog 2, EZH2)特异性抑制剂与ABCB1和ABCG2的亲和力,以及它们渗透入脑的能力。第二部分我们研究了特异性抑制AB点击此处CB1和ABCG2是否能增强BRAF抑制剂-威罗菲尼(Vemurafenib)治疗黑色素瘤脑转移灶的疗效。第一部分ABCB1和ABCG2限制多种EZH2抑制剂渗透入脑目前发现EZH2在GBM中表达上调,过表达的EZH2通过抑制分化来维持肿瘤细胞的干细胞性,这一作用提示EZH2是胶质瘤进展所必须的。另外,EZH2可以结合并甲基化信号转导与转录激活因子3(SigBVD-523化学结构nal Transducer and Activator of Transcription3, STAT3),从而增强胶质瘤肿瘤样干细胞(Glioma stem-like cell,GSC)中STAT3的活性,最终促进GSC自我更新及GBM恶化。而抑制EZH2功能,可以阻断GSC自我更新及存活相关的多条信号通路,提示EZH2是一个非常有前途的GBM治疗靶点。Y-27632 花费基于以上研究背景,我们探讨了5种结构非常相似的EZH2抑制剂(EPZ005687,EPZ-6438,UNC1999,GSK343和GSK126)与ABCB1和ABCG2的相互作用。我们先在体外利用Transwell实验对这些化合物进行了筛选,然后利用野生型(Wild-type, WT), Abcbl和／或Abcg2基因敲除鼠进行了体内实验,进一步研究了EPZ005687,EPZ-6438和GSK126体内药代动力学及BBB透过能力等。

肝脏,肾脏,心脏,脾脏,肺脏,脾脏的组织病理学均正常。IG-105的人血浆蛋白结合率高,为98%左右。 IG-105靶点明确,作用机制清楚,体内外抗肿瘤活性高,对耐药肿瘤有效,安全性好,治疗指数高,具有明显的临床应用前景。已申请中国专利(200510105255.5)和国际专利(PCT/CN2006/002298)各1项。本论文的部分工作发表在Clinical Cancer Research(selleckchem2008,in press)。
近些年来研究发现Wnt/β-catenin在多种实体肿瘤及血液肿瘤中存在异常激活状态并在肿瘤的发生、维持等方面起着一些重要的作用;β-catenin的异常积累增高是其中的关键环节。慢粒急变中,β-catenin水平增高是粒巨祖细胞(GMP)发生白血病干细胞(LSC)转化的重要机制。在慢粒由慢性期进展为加速/急变期的过程中,常发现β-c一般atenin表达水平增高。然而目前β-catenin在慢粒疾病进展中的确切作用尚未阐明。基于这些研究背景,本论文设计在先前的工作基础上,以β-catenin为靶点,特异性上调或下调β-catenin表达水平后,观察CML细胞生物学功能的改变,以期为进一步研究揭示慢粒急变机制提供一些线索,同时也为慢粒进展期的治疗寻找一些可能途径。 本论文实验工作分为两部分: 一、延续本哪里实验室前期的体外研究工作,特异性干扰β-catenin后,观察K562细胞体内成瘤能力的变化。裸鼠皮下成瘤实验证实干扰后K562细胞成瘤能力明显受抑:①成瘤率:未干扰组(n=9)、对照组(无关序列干扰)(n=8)和干扰组(β-catenin特异性干扰)(n=9)成瘤率分别为100%、87.5%和0,干扰组成瘤率与前两组有显著的统计学差异(P＜0.001);②成瘤曲线:前两组均成瘤,最终瘤块体积无统计学差异,但未干扰组瘤块体积增长略快;干扰组未见成瘤。