而化合物c3a经CDK1/cyclin B, CDK2/cyclin A体外酶抑制实验,以及对肿瘤细胞HCT116、PC3和MDA-MB231的抗增殖实验均表现出显著的抑制作用,对CDK1和CDK2的抑制作用与Roscovitine相比分别提高了7倍和4倍。 本论文共计合成50个嘌呤衍生物用于CDK抑制活性的研究,其中化合物c3a能显著抑制CDhttp://www.selleck.cn/products/obeticholic-acid.htmlK1/2的活性,对测试的肿瘤细胞也有很好的抑制作用,酶活性与细胞活性与阳性对照相比都有了很大的提高。 在本论文第二部分研究中,我们以组蛋白去乙酰化酶(HDACs)为研究靶点。该酶在变异细胞中活性失调,使得原有的基因表达平衡状态被打破,导致一些影响细胞增殖和调控细胞周期的分子表达失衡,进而导致细胞恶变。而HDACs抑制剂通常可以逆转这一过程,有效抑制肿瘤细胞的生长,诱导末端分化或癌细胞的凋亡,成为抗肿瘤药物研究的热点。 通过文献调研发现嘌呤类衍生物及其生物电子等排体有显著的HDAC抑制活性,本文根据经典的药效团模型,以不同取代嘌呤作为酶表面识别区域,以异羟肟酸为锌离子螯合基团,并以不同链长的脂肪氨基酸作为连接链,设计并合成了一系列的嘌呤衍Rigosertib分子量生物,对嘌呤2,6不同取代和9位链长进行了研究,采用Color de LysTM实验方法和MTT法分别对化合物的HDAC抑制活性和抗肿瘤细胞的增殖活性进行评价,最终对有显著酶活性的化合物进行分子对接,分析化合物与酶的结合模式,为化合物的进一步改造提供依据。 经酶活性的初筛,确定连接链长为5个亚甲基时,化合物的酶活性最强,对其继续进行改造,发现在嘌呤2位引入芳胺取代之后,化合物的活性能提高1个数量级。

通过称重法比较药物组与对照组(CL组)大鼠膀胱相对重量；采用组织切片HE染色法观察大鼠膀胱粘膜上皮的组织病理学形态改变及定量评分；采用TUNEL法检测药物治疗后大鼠膀胱组织肿瘤细胞的凋亡情况并计算凋亡指数；采用蛋白免疫印迹法测定药物治疗后大鼠膀胱组织肿瘤细胞凋亡相关蛋白Bax、Caspase3、Bcl-2及自噬相关蛋白Atg5、Beclin1、L可能C3的表达。结果 膀胱灌注MNU建立大鼠原位膀胱癌模型成功率为93.3%(28/30),实验大鼠死亡率为13.3%(4/30),第8周行病理学检查已可见原位膀胱癌的特征表现,且无明显远处转移病灶。雷公藤甲素组的大鼠的膀胱绝对重量(162.50±12.13mg)低于生理盐水组(177.00±13.82 mg,P0.05),购买Roxadustat其膀胱相对重量(0.49±0.05)低于生理盐水组(0.56±0.06,P0.05),各组的大鼠最终体重无明显差异。与对照组相比,药物三组的组织切片HE染色法均表现大鼠膀胱原位癌的特征表现,且雷公藤甲素组的HE评分(2.13±0.95)低于生理盐水组(4.00±1.19,P<0.05)和丝裂霉素组(3.06±0.62,P哪里<0.05)。TUNEL法检测雷公藤甲素组的凋亡指数均数为(32.30±8.16)%,高于对照组、生理盐水组及丝裂霉素组(P
目的:弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphom,DLBCL)是非霍奇金淋巴瘤中最为常见的一类具有明显异质性的恶性肿瘤。本文探讨59例初诊DLBCL患者的一般临床资料及免疫组织化学资料特点,并分析其预后意义,进一步从分子水平上认识DLBCL。

目前发现多个p38MAPK抑制剂能够增强肿瘤对化疗药物的敏感性,但机制尚不明确。因此我们选取了已进入Ⅲ期临床试验的新一代p38抑制剂BIRB796作为研究对象,探讨它是否能后逆转ABC转运蛋白介导的MDR。方法：MTT (3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide, MTT)法检测细胞毒实验；流式细胞仪检测阿霉素、罗{Selleck Anti-infection Compound Library|Selleck Antiinfection Compound Library|Selleck Anti-infection Compound Library|Selleck Antiinfection Compound Library|selleck Anti-infection Compound Library|selleck Antiinfection Compound Library|selleck Anti-infection Compound Library|selleck Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|buy Anti-infection Compound Library|Anti-infection Compound Library半抑制浓度|Anti-infection Compound Library价格|Anti-infection Compound Library花费|Anti-infection Compound Library溶解度|Anti-infection Compound Library购买|Anti-infection Compound Library制造商|Anti-infection Compound Library查找购买|Anti-infection Compound Library订单|Anti-infection Compound Library mouse|Anti-infection Compound Library chemical structure|Anti-infection Compound Library分子量|Anti-infection Compound Library molecular weight|Anti-infection Compound Library数据表|Anti-infection Compound Library supplier|Anti-infection Compound Library体外|Anti-infection Compound Library细胞系|Anti-infection Compound Library concentration|Anti-infection Compound Library nmr|Anti-infection Compound Library体内|Anti-infection Compound Library clinical trial|Anti-infection Compound Library cell assay|Anti-infection Compound Library screening|Anti-infection Compound Library high throughput|buy Antiinfection Compound Library|Antiinfection Compound Library半抑制浓度|Antiinfection Compound Library价格|Antiinfection Compound Library花费|Antiinfection Compound Library溶解度|Antiinfection Compound Library购买|Antiinfection Compound Library制造商|Antiinfection Compound Library查找购买|Antiinfection Compound Library订单|Antiinfection Compound Library chemical structure|Antiinfection Compound Library数据表|Antiinfection Compound Library supplier|Antiinfection Compound Library体外|Antiinfection Compound Library细胞系|Antiinfection Compound Library concentration|Antiinfection Compound Library clinical trial|Antiinfection Compound Library cell assay|Antiinfection Compound Library screening|Antiinfection Compound Library high throughput|Anti-infection Compound high throughput screening|丹明123在细胞内的积累；以KBV200细胞建立裸鼠移植瘤模型探讨BIRB796体内逆转活性；蛋白测定用Western blotting法;ABCB1在mRNA表达水平用PCR和RT-PCR法测定；ATPase试剂盒测定BIRB796对ABCB1ATPase活性的影响；瞬时干扰RNA法观察沉默p38后,用MTT法检测紫杉醇对KBV200细胞的细胞毒性；Docking实不验模拟BIRB796与ABCB1的结合位点。结果：本研究通过MTT法证实了p38MAPK抑制剂BIRB796能够特异性的逆转ABCB1所介导MDR,但对ABCG2和ABCC1介导MDR却无逆转作用。通过流式细胞仪检测证明了BIRB796是通过增加ABCB1的底物(罗丹明123和阿霉素)在细胞中的浓度来实现逆转效果的。我们利用高表达ABCB1的KBV200细胞建立MDR时间裸鼠移植瘤模型,进一步验证了BIRB796在裸鼠体内逆转效果。Western blot以及PCR/Real time PCR结果显示BIRB796不改变ABCB1在蛋白和mRNA水平的表达。通过Pgp-GloTM试剂盒检测ABCB1ATPase的活性实验证明了BIRB796是通过调节ABCB1的ATP水解酶的活性来从而抑制了ABCB1的外排功能。通过瞬时干扰p38MAPK,证明了p38信号通路对BIRB796逆转ABCB1介导MDR没有协同作用。

4.转染miR-125b反义核酸的骨肉瘤细胞MG-63和Saos-2中STAT3蛋白表达量升高。 结论：STAT3是miR-125b的靶基因,miR-125b通过结合STAT3的3′UTR区抑制靶基因STAT3的表达。 第三节STAT3对miR-125b的转录激活作用 目的：探讨STAT3作为重要的转录因子能否转录激活miR-125b。 方BAY 73-4506体内法： 1.我们首先采取CONSITE和PromoterInspector软件分析预测成熟miR-125b在人基因组上的两个基因位点上游的10kb序列,分别是11号染色体上的miR-125b-1,21号染色体上的miR-125b-2。找到潜在的启动子区域。 2.构建荧光素酶表达载体将miR-125b-1前体5’端不同Doxorubicin长度片段(-1600to-900bp,-1400to-900bp,-1175to-900bp)序列克隆至PGL3载体。再转染到骨肉瘤细胞MG-63和Saos-2中,转染48小时后收取细胞,本实验采取双荧光素酶报告基因系统,以海肾荧光素酶(Renilla)作为内参,检测萤火虫荧光素酶(Firefly)的活性。最终以二获悉更多者的比值作为相对表达量数值(Firefly/Renilla)。 3.我们选用MatInspector软件对启动子区域的顺式作用元件进行分析,找出可能存在的转录因子结合位点。 4.采取点突变的办法使-1175to-900bp序列中潜在的STAT3结合序列、STAT6结合序列和CAAT序列发生碱基突变,构成PGL3-mSTAT3,PGL3-mSTAT6和PGL3-mCAAT突变荧光素酶报告基因质粒。

其他系统的恶性肿瘤发生脑转移的几率也非常高,例如肺癌发生脑转移5年累积概率为16%,乳腺癌为7%,结肠癌为5%,而黑色素瘤脑转移率可高达40%以上。尽管人们对癌症发生、发展的分子机制了解有了巨大的进步,对治疗恶性肿瘤的靶向药物的研发也有了长足的发展,但是中枢神经系统(Central nervous system, CNS)就像肿瘤细胞的避难所,治疗颅GW786034内疾病(如原发颅内恶性肿瘤和转移瘤)的药物很难有效到达颅内病灶,这个问题一直困扰着所有CNS癌症研究者们。这一现象主要是由于血脑屏障(Blood-brain barrier, BBB)的存在而引起的。在正常状态下,BBB起到保护脑组织免受内源性和外源性有毒物质损伤。但是另一方面,这一屏障又可以阻挡大部分传统的或新型药物从血液因为循环系统进入脑实质或者脑内病灶。因此有很多实验在研究BBB形成的机制,以及如何规避BBB对治疗药物运输的阻碍作用。BBB主要是由血管内皮细胞构成。与身体其他部位的血管内皮细胞相比,BBB内皮细胞的胞膜缺少孔隙,胞饮作用活力低,紧密连接将它们紧紧的连接在一起。而且这些内皮细胞又同时被周细胞、星形细胞等紧密包绕,形成了第二层致密为什么的脂质层。这些特性使得物质很难穿过BBB。一些必需的营养物质(如葡萄糖)进入脑内受一些摄取转运蛋白严格调控。其他物质通过BBB只能依靠被动扩散。被动扩散能力取决于分子脂溶性,分子质量,电离度,血浆蛋白结合力和组织结合力等。然而一些物质即使具备良好的被动扩散的分子特性,它们穿透BBB进入脑实质内的能力仍远远低于预期。经过多年努力,研究者发现BBB上存在一系列外排转运蛋白,它们可以进一步限制治疗药物进入脑内。

WB比较MHCC-97H和MHCC97H-OXA细胞中Aurora-A和IDl的表达,发现MHCC97H-OXA中Aurora-A和ID1表达均较野生株升高。通过划痕实验分析耐药细胞株的迁移能力,结果发现MHCC97H-OXA细胞株的迁移明显增强(P<0.0001)。进而通过Transwell实验分析耐药细胞株的GPCR Compound Library chemical structure侵袭能力,发现MHCC97H-OXA细胞株的侵袭能力显著增强(P<0.0001),对奥沙利铂的敏感性显著增强(P<0.0001),显著增加其对奥沙利铂的敏感性(P<0.0001)、侵袭能力(P<0.0001)、克隆形成能力均明显受抑(P<0.0001),VX-689也逆转了MHCC97HGSK126研究购买-OXA细胞的耐药性(P<0.0001)。4.对152例HCC患者的组织进行免疫组化分析,中位随访时间为51.17±21.46个月。Aurora-A高表达患者58例,低表达94例。低表达组的中位0S尚未达到,高表达组的中位0S为30个月,P<0.001；低表达组的中位RFS尚未达到,而高点击此处表达组的中位RFS为15个月,两组间比较P值<0.001。ID1高表达组患者68例,低表达患者84例,低表达组的中位OS尚未达到,高表达组的中位OS为35个月,P
近年来食管癌的死亡率逐渐增高，在世界恶性肿瘤死亡率中也位居前列，而我国正是食管癌的高发地区。目前恶性肿瘤的治疗方法有手术、放疗、化学治疗和免疫治疗等手段，以化学治疗为主的综合治疗在其中占有十分重要的地位。

PTEN在肿瘤大小以及IGF-1R在肿瘤分期的不同组间的表达有显著性差异。mTOR、PTEN、IGF-1R这三项指标在NSCLC癌组织中的蛋白表达阳性率分别为51.80%、53.70%和83.30%;mTOR蛋白表达水平以及IGF-1R蛋白表达水平在NSCLC肿瘤大小不同组间比较有统计学差异(P=0.038和P=0.028)。根据R那个OC曲线下面积的取值计算诊断的敏感性和特异性,mTOR、PTEN、IGF-1R指标联合检测NSCLC的敏感性、特异性和准确率分别为:98.15%、88.57%和94.40%。 结论: 1.在肺癌组织和癌旁组织中的mTOR、PTEN、IGF-1R、4EBP1四项指标的mRNA表达的相对水平有显著性差异。肺癌组而且织中mTOR表达明显增高,而PTEN、IGF-1R、4EBP1三项指标在肺癌组织中表达则明显减少。PTEN在肿瘤≤3cm和>3cm两组间差异具有显著性(P=0.016),IGF-1R在临床分期Ⅰ期、Ⅱ期(早期)和Ⅲ期两组间差异具有显著性(P=0.036)。 2.免疫组化结果显示,mTOR蛋白表达水平以及IGselleck激酶抑制剂F-1R蛋白表达水平在NSCLC肿瘤大小不同组间比较有统计学差异。 3. mTOR、PTEN、IGF-1R、4EBP1四项指标检测非小细胞肺癌,单独应用一种指标检测敏感性最好的是PTEN,特异性最好的指标是mTOR;mTOR、PTEN、IGF-1R三种指标的联合检测非小细胞肺癌的敏感性、特异性、准确率较高,分别为98.15%、88.57%和94.4%;在肺癌的诊断中有潜在的临床意义。

为了考察分子柔性对活性的影响,本章采用相对柔性的酪氨酸结构片段代替四氢异喹啉-3-羧酸系列HDACs抑制剂骨架结构中的刚性四氢异喹啉-3-羧酸结构片段。设计合成的13个酪氨酸系列化合物结构经过1HNMR和HRMS确证。经查阅文献证实,所合成的目标化合物均为新型化合物,未见文献或专利报道。 我们首先对目标化合物进行了H和DAC8的抑酶活性筛选和体外人乳腺癌细胞(MDA-MB-231)、肺癌细胞(A549)和结肠癌细胞(HCT116)的抗增直活性筛选,结果表明酪氨酸系列化合物与四氢异喹啉-3-羧酸系列化合物相比,有较强的HDAC8抑酶活性和较弱的抗肿瘤细胞增殖活性。其中,目标化合物Q1、Q2、Q3和Q4的HDDepsipeptide购买AC8抑酶活性比SAHA强10倍以上。进一步的以HeLa细胞核提取物为酶源(主要含HDAC1和HDAC2)的测试结果表明,化合物Q1-Q4的活性明显差于SAHA,这可能是该系列化合物抗肿瘤细胞增殖活性较差的原因,因为研究表明HDAC1和HDAC2的活性与肿瘤细胞增殖密切相关。这些结果提示我们SB203580分子重量酪氨酸衍生物类HDACs抑制剂具有一定的HDAC8亚型选择性,有希望进一步设计改造成为高选择性的HDAC8选择性抑制剂。 四.以1,4-二硫-7-氮杂螺[4,4]壬烷-8-羧酸为骨架结构的直链异羟肟酸类组蛋白去乙酰化酶抑制剂的设计、合成及抗肿瘤活性研究 根据已知的HDACs抑制剂的药效团模型,结合经典的类肽化合物作为酶抑制剂的设计策略,我们设计了一系列直链类异羟肟酸化合物。

4. ZYJ-34c比SAHA具有更显著的诱导p21WAF1转录和表达的作用 检测了一系列周期相关分子,如p21WAF1、p27、p57、c-myc、p53和bcr-abl, ZYJ-34c的更强的细胞周期阻滞作用主要是由对p21WAF1的上调和对bcr-abl的抑制所介导。 5. ZYJ-34c更显著地诱导p21WAF1基因启动子相关染色质乙酰化组蛋白累Selleck R428积 相比SAHA,ZYJ-34c具有对HDAC更强的抑制活性,ChIP技术证明ZYJ-34c更显著地提高p21WAF1基因启动子相关染色质组蛋白乙酰化的水平。 6. ZYJ-34c或SAHA诱导的G1期细胞周期阻滞是p21WAF1依赖的 成功构建p21-shRNA,p21-shRNA沉默K562细胞中p21WAF1后,组蛋白去乙酰所以化酶抑制剂诱导的细胞周期阻滞被严重削弱。 7.选择性下调血液系统肿瘤的Cyclin A,可能是SAHA对血液肿瘤比实体肿瘤更加敏感的机制 通过比较实体瘤细胞(H7402细胞系)和白血病细胞(K562细胞系),发现白血病细胞系中Cyclin A高表达,并在SAHA作用后,显著下调；而在H7402细胞中本身Cyclin A表达较弱,并哪里在SAHA作用后没有显著变化。 结论： 研究内容第一部分： 1.在肝癌细胞中,组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHA的低剂量预处理,能够显著增强肝癌细胞中“压力诱导”分子MICA的表达,通过其与表达活化性受体NKG2D的NK细胞的相互作用,增强其对NK细胞的杀伤敏感性。NK细胞活化性受体的配体的表达上调,能够逆转肿瘤诱导的NK抑制,增强NK细胞的抗肿瘤作用。 2.在肝癌细胞中,miR-93和miR-106b是高表达的。

进行重组腺病毒Ad5F35-SD及其突变体Ad5F35-SmD的扩增和滴度测定。 2．重组腺病毒预处理的K562细胞裸鼠皮下移植瘤模型的建立。用Ad5F35-SD或者Ad5F35-SmD分别感染K562细胞，将预处理后的K562细胞注射到经射线照射后的裸鼠腋下,观察裸鼠皮下移植瘤的成瘤和瘤体生长状况。 3．重组腺病毒对K562细胞裸鼠皮下移植瘤治疗模确认细节型的建立。将K562细胞注射到经射线照射后的裸鼠腋下，成瘤之后分组，用Ad5F35-SD或者Ad5F35-SmD在瘤体内多点注射，观察裸鼠皮下移植瘤的生长状况和肿瘤细胞的形态学变化；电镜和TUNEL法检测皮下移植瘤细胞凋亡；免疫组化检测凋亡蛋白caspase-3和caspase-8表达。 通过以上实验，获得如下结果和结论： selleck screening library1．重组腺病毒Ad5F35-SD和Ad5F35-SmD扩增成功，滴度可达1.4×1012pfu/ml。 2．与对照组相比，经过Ad5F35-SD预处理后的K562细胞裸鼠皮下移植瘤成瘤少，且瘤体增长缓慢甚至无明显增长。 3．K562细胞裸鼠皮下移植瘤成瘤后，用Ad5F35-SD原位注射瘤体组出现肿瘤体积明显变小，TUNEL显PD0325901订单示皮下移植瘤组织大量的细胞核呈棕黄色，细胞核和细胞质浓缩，细胞质呈红色，细胞形态不规则；电镜下细胞核呈不规则形，染色质边集，且出现凋亡小体。免疫组化显示凋亡相关蛋白caspase-3和caspase-8表达上调。 实验结果证实重组腺病毒Ad5F35-SD能够减轻K562细胞在裸鼠体内的致瘤能力，并且能够通过诱导肿瘤细胞凋亡来抑制裸鼠皮下移植瘤的生长。
研究背景： 肿瘤细胞放化疗抵抗常可导致肿瘤预后不良。