进行重组腺病毒Ad5F35-SD及其突变体Ad5F35-SmD的扩增和滴度测定。 2.重组腺病毒预处理的K562细胞裸鼠皮下移植瘤模型的建立。用Ad5F35-SD或者Ad5F35-SmD分别感染K562细胞,将预处理后的K562细胞注射到经射线照射后的裸鼠腋下,观察裸鼠皮下移植瘤的成瘤和瘤体生长状况。 3.重组腺病毒对K562细胞裸鼠皮下移植瘤治疗模确认细节型的建立。将K562细胞注射到经射线照射后的裸鼠腋下,成瘤之后分组,用Ad5F35-SD或者Ad5F35-SmD在瘤体内多点注射,观察裸鼠皮下移植瘤的生长状况和肿瘤细胞的形态学变化;电镜和TUNEL法检测皮下移植瘤细胞凋亡;免疫组化检测凋亡蛋白caspase-3和caspase-8表达。 通过以上实验,获得如下结果和结论: selleck screening library1.重组腺病毒Ad5F35-SD和Ad5F35-SmD扩增成功,滴度可达1.4×1012pfu/ml。 2.与对照组相比,经过Ad5F35-SD预处理后的K562细胞裸鼠皮下移植瘤成瘤少,且瘤体增长缓慢甚至无明显增长。 3.K562细胞裸鼠皮下移植瘤成瘤后,用Ad5F35-SD原位注射瘤体组出现肿瘤体积明显变小,TUNEL显PD0325901订单示皮下移植瘤组织大量的细胞核呈棕黄色,细胞核和细胞质浓缩,细胞质呈红色,细胞形态不规则;电镜下细胞核呈不规则形,染色质边集,且出现凋亡小体。免疫组化显示凋亡相关蛋白caspase-3和caspase-8表达上调。 实验结果证实重组腺病毒Ad5F35-SD能够减轻K562细胞在裸鼠体内的致瘤能力,并且能够通过诱导肿瘤细胞凋亡来抑制裸鼠皮下移植瘤的生长。
研究背景: 肿瘤细胞放化疗抵抗常可导致肿瘤预后不良。