21±0.39、2.27±0.28、2.21±0.27、1.93±0.30、1.64±0.31、1.85±0.41;人参皂苷Rg1各组p-JNK蛋白含量显著降低,与模型组比较有显著性差异(P＜0.05),其中10 mg/kg组p-JNK蛋白含量最高,40 mg/kg组p-JNK蛋白含量最低;10、40 mg/kg组与阳性药物对照组比较有显著性差异(P＜0.05),而20 mg/kg组与阳性药物对照组比较无统计学差异(P＞0.05)。 (2)假手术组、模型组、人参皂苷Rg1 10、20、40 mg/kg组和阳性药物对照组海马CA1区p-c-jun蛋白表达含量分别为0.51±0.07、2.02±0.17、1.21±0.11、0.87±0.22、0.69±0.07、0.80±0.18;模型组大鼠p-c-jun含量最高,假手术组p-c-jun含量最低;人参皂苷Rg1

20、40 mg/kg组p-c-jun蛋白含量显著降低,与模型组比较有显著性差异(P＜0.05),其中40 mg/kg组p-c-jun蛋白含量最低;人参皂苷Rg1 10 mg/kg组与阳性药物对照组比较有显著性差异(P＜0.05),而Rg1 20、40 mg/kg组与阳性药物对照组比较无统计学差异(P＞0.05)。 结论: 1.人参皂苷Rg1可以显著改善脑缺血再灌注大鼠的神经功能缺损症状。 2.人参皂苷Rg1能显著降低脑缺血再灌注大鼠海马CA1区神经元凋亡率;进一步研究显示Rg1可能通过抑制脑缺血后海马CA1区的JNK及其效应分子c-jun的活化,进一步调节死亡受体、线粒体依赖的凋亡途径,抑制脑缺血再灌注后的神经元凋亡,降低缺血后迟发性神经元死亡,控制缺血半暗带向梗死区的发展,以发挥其对脑缺血再灌注损伤的保护作用。
肝细胞癌是目前严重威胁人类生命安全的疾病之一。寻求高效低毒的抗肿瘤药物及治疗方法一直是科学界研究的热点。氯喹是老药,具有广泛的生理学效应,以往主要用来治疗疟疾、自身免疫性疾病等,近年来发现氯喹具有治疗肿瘤的作用。本研究旨在研究氯喹的抗肝细胞癌作用并对其作用机制进行探讨。采用MTT法检测氯喹对人肝细胞癌HepG2细胞生长抑制作用;采用流式细胞术检测氯喹对人肝细胞癌HepG2细胞周期和凋亡的影响;采用免疫印迹法检测氯喹对HepG2细胞周期蛋白cyclinB1及NF-кB、p-IкBa、ERK、p-JNK和P38蛋白表达水平的影响。结果表明,氯喹可抑制HepG2细胞生长,诱导细胞发生G2/M期阻滞而影响细胞周期进程以及通过抑制HepG2细胞周期蛋白cyclinB1表达、抑制NF-кB、p-IкBa及ERK和诱导p-JNK蛋白表达水平促进细胞凋亡和抑制细胞增殖有关。本研究结果将为肝细胞癌的治疗提供新的药物,并且对老药氯喹用于治疗肝细胞癌的临床应用提供重要的实验依据。
【目的】建立三种干细胞即神经干细胞(NSC)、骨髓问充质细胞(BMSC)和造血干细胞(HSC),及两种支持细胞即嗅鞘细胞(OEC)和雪旺细胞(SC)的体外培养技术,并将两种支持细胞分别和三种干细胞分别联合移植入SD大鼠和猴损伤的脊髓,筛选出细胞联合移植治疗SCI的优化方案,并探讨与其相关的分子表达,找出相对重要的调节分子,研究该分子在SCI中的作用。为寻找细胞移植治疗SCI的有效方法和相关的分子机制提供实验依据,为指导临床应用干细胞移植治疗SCI提供新思路。

或者 Sunitinib研究购买 【方法】 1.建立嗅鞘细胞、雪旺细胞、神经干细胞、骨髓间充质细胞和造血干细胞的体外培养技术,并对培养细胞进行鉴定。 2.建立SD大鼠脊髓T10全横断损伤模型。将动物分假手术组、单纯脊髓全横断手术组、脊髓全横断手术注射免疫抑制剂组,NSC移植组、BMSC移植组、HSC移植组、SC细胞移植组,OEC移植组,以及NSC+OEC,BMSC+OEC,HSC+SC联合移植组。术后14d沿原切口暴露损伤脊髓,选取距离瘢痕5mm的脊髓上下端和瘢痕各取左右两个位点(脊髓上下端旁开脊髓后正中沟0.5mm,瘢痕处的左右侧位点参照脊髓上下端的左右位点定位),共6个位点用立体定向仪进行细胞移植(1.0×10~5/5uL,每个位点)。用5mg/kg/天腹腔注射环孢素(CsA)以减轻细胞移植后的免疫排斥反应。 或者 3.后肢运动功能评分:移植术后1～24周,采用双盲法由三名观察人员每周末进行大鼠后肢BBB运动功能评分。最后将三人所得分值求平均分后进行统计学处理。筛选出促进脊髓损伤功能恢复最好的一组为NSC+OEC联合移植组。 4.神经电生理检测:对NSC+OEC联合移植组,及其相应对照组进行神经电生理检测,进一步探讨NSC+OEC联合移植组促进SCI的实验依据。 (1)运动诱发电位(MEP)的测定 采用了神经电生理经颅磁刺激器对NSC+OEC联合移植组14d组,及其对照组假手术组、脊髓全横断手术注射免疫抑制剂组、NSC移植组和OEC移植组的MEP进行检测。3.6%水合三氯乙醛麻醉固定动物后,用盘状电极通过导电膏粘附于大鼠耳朵作为地线,记录电极置于大腿股四头肌,正负电极间距1cm,磁力板中心置于大脑皮质运动区之上刺激大脑皮质,以刺激强度40%刺激大脑皮质,记录股四头肌收集到得电位变化,待波形稳定且重复3次时中止并描记结果。

(2)皮层体感诱发电位(CSEP)的测定 本实验采用了皮层体感诱发仪(MEDTRONIC公司产品-KEYPOINY)对移植14d的NSC+OEC联合移植组,及其对照组假手术组、脊髓全横断手术注射免疫抑制剂组、NSC移植组和OEC移植组进行了检测。电流为方波脉冲型,刺激电极置于大鼠左下肢胫后神经处,正负电极间距为1cm,参考电极置于大鼠鼻正中皮下,记录电极置于大鼠右侧大脑皮层处皮下,接地电极置于大鼠耳朵。参数设置:扫描速度10ms/D,灵敏度10uv/D,滤波低频10Hz,滤波高频2KHz,刺激强度以引起大鼠后爪抖动为止。每次均记录300次波形后将其叠加平均得到最终的检测结果。 5.植入细胞存活检测: 在第12和24W末取部分动物用3.6%的水合氯醛进行腹腔注射麻醉,4%的多聚甲醛灌注固定后取材、冰冻切片,荧光显微镜下观察植入细胞存活,迁移。 6.PCR扩增疤痕组织的神经营养因子及其受体,和凋亡相关因子: 将14d、21d、28d的各组全横断脊髓(手术注射免疫抑制剂组、NSC移植组、OEC移植组和NSC+OEC联合移植组)活体取出疤痕部位及临近组织,匀浆、裂解、提取总RNA、逆转录合成cDNA,进行神经营养因子NGF、BDNF、NT-3、CNTF、PDGF-B、IGF-1、bFGF、TGF-β1,及其受体TrkA、TrkB和TrkC,和凋亡相关因子Bax、Bcl-2、Caspase-3及内参照β-actin的PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物。测光密度值,进行统计学分析,筛选出有变化的因子。推测其中与SCI有关的重要分子。 7.

Confluent layers of ESMC were stimulated by 10nM ET – 1; expression of C…
Extrasynaptic alpha6 – beta – delta subtype of gamma – aminobutyric acid type A receptors (GABA – 因为 A – R) mediate tonic inhibition in cerebellar granule cells (CGC). We have shown that AMPA receptor (AMPA – R) activation up – regulates GABA – A – R delta mRNA expression in cultured GCGs.

AMPA – R…
We recently demonstrated that erythropoietin(EPO)protects cardiomyocytes from apoptosis during myocardial ischemia and reperfusion(I/R).The objective of the present study was to investigate the role of heme oxygenase-1(HO-1)in the anti-apoptotic effects of EPO.Primary cultures of neonatal mouse c…
The effect of angiotensinⅡ(AngⅡ),an important regulator of cardiovascular system,on cardiac Silmitasertib分子重量 contractility is not clear.In Langendorff mouse hearts,perfused at constant pressure,AngⅡ(3 nmol/L)transiently decreased(P
Our previous data demonstrated that imatinib,a selective small-molecule protein kinase inhibitor, stimulated histone H2AX phosphorylation(Ser 139) through caspase-3/Mstl pathway in chronic myelogenous leukemia(CML) cells(K562 cells).The

H2AX phosphorylation(Ser 139) is required for apoptosis of K…
目的探讨沙眼衣原体pORF5蛋白对IL-1β和IL-18等促炎性细胞因子的诱生作用,并初步分析其分子机制。方法采用分子生物学方法制备、纯化沙眼衣原体pORF5蛋白,用3~361μg/mL不同浓度刺激THP-1细胞,并于0h、8h、1 6h、24h、36h收集上清及细胞,ELISA检测IL-1β和IL-18的含量;QRT-PCR检测NALP3炎性体和IL-1β和IL-1 8 mRNA表达水平;分别用NALP3 siRNA、ASC siRNA转染
Objective: To investigate the protective effect of mitogen-activated protein kinase family(MAPKS)in myocar-dial injury in severely scalded rats. Methods: Wistar rats were used in this study and them were inflicted with30% Ⅲdegree scald on the back. The samples of plasma 更多 and myocardial tissue wer…
目的研究肠三叶因子(ITF)促进肠上皮细胞增殖的信号转导机制。方法分离提取肠上皮细胞膜, 以膜结合法测定细胞膜 ITF 受体蛋白酪氨酸激酶(PTK)活性。在体外培养的肠上皮细胞株 IEC-6上,观察在 ITF 的刺激下以及使用信号转导阻断剂 PD098059、SB202190、SB202474分别阻断丝裂素活化蛋白激酶家系(MAPKs)中3种激酶[细胞外信号调节激酶(ERKs)、蛋白激酶

p38(p38)、应激活化蛋白激酶(SAPK)] 后 IEC-6 DNA 合成率及 MAPK 活性的变化。结果 ITF 受体具有 PTK 活性,在 ITF 的刺激下 ITF 受体 PTK 活性、IEC-…
目的:观察p38MAPK信号转导通路在17β雌二醇和雷洛昔芬促成骨细胞增殖和分化过程中的作用。方法:取第一继代 BALB／c小鼠头盖骨成骨细胞,药物刺激组分别加人不同浓度1β-雌二醇或雷洛昔芬;含阻断剂组预先添加不同浓度的SB202190(p38MAPK 的阻断剂)阻断信号转导通路,再加17β-雌二醇或雷洛昔芬,作用72小时后用MTT法与PNPP法测定细胞的增殖能力和碱性磷酸酶活性。结果:加入雌激素或雷洛昔芬后,成骨细胞的增殖和分化明显增强,与空白对照组比较差异具有显著性意义(P<0.05);阻断p38MAPK信号转导通路后,细胞增殖分化受到明显抑制,5未阻断组比较差异具有非常显著性意义(P<...
目的:combretastatin A4是一种血管靶向药物,它通过抑制微管聚集,杀死内皮细胞, 降低肿瘤血管血液流量,从而导致肿瘤的坏死。MAPKs 是一类可传导胞外信号进入细胞核内, 导致核内基因表达和细胞功能发生改变的蛋白激酶。普遍认为,MAPKs 家族中的 ERK1/2在微管靶向药物所介导的细胞毒性中起保护作用,而 p38 MAPK 则促进了细胞的调亡。本研究旨在探究 MAPKs 蛋白激酶在 combretastatin A4介导的细胞毒性所起的作用。方法:用 western blot 法检测特异性蛋白量的变化,用流式细胞术检测药物对细胞周期的影响,用 SRB 法检测细胞毒性作用。结果:…
目的检测新基因 URG11在胃癌细胞系及胃癌组织中的表达；阐明 URG11和胃癌细胞转移的关系以及促进胃癌细胞转移的分子机制。方法 (1)Western blot 和 RT-PCR 检测 URG11在多种胃癌细胞系和永生化胃黏膜上皮细胞 GES 中的表达；(2)免疫组织化学染色检测 URG11在100例胃癌和癌旁组织中的表达；(3)构建 URG11的 RNAi 载体,转染胃癌细胞系 MKN28并筛选得到低表达 URG11的细胞系； (4)黏附实验、侵袭实验、裸鼠体内肝转移实验检测转染细胞体外、体内转移能力；(5)Western blot 检测转染细胞 mmp2,mmp9,p38,ERK1…

1-DCN质粒纯化,酶切鉴定,又用脂质体介导法将其转染
肝癌是诊治困难、预后极差的一种恶性肿瘤,全球肝癌发病率、病死率均位居各肿瘤前列,转移复发是影响肝细胞性肝癌(human hepatocellular carcinoma,HCC)术后生存的最大障碍。肝癌的发生发展以及转移复发均是多因素参与的多环节的病理过程,传统的单基因研究模式限制了肝癌相关因素的研究发展。近年来迅速发展的蛋白质组学研究,能动态、整体、定量地考察疾病发生发展过程中全部蛋白质种类和数量的变化,对于探讨疾病机理、寻找疾病诊断的特异性标志物和药物治疗的靶标来说,是一种有效的高通量的研究模式,可获得一些传统手段无法得到的新蛋白标志物、新关键分子,极大地丰富诊断标志物的选择组合及复杂致病机理的全面阐明。运用该研究策略,本研究通过对转移和非转移人肝细胞性肝癌组织、肝癌与癌旁组织的全蛋白质组表达谱差异分析,筛选出一些有潜在应用价值的差异蛋白质,并对其中的差异分子HSP27在肝癌组织和肝癌细胞系中进行验证,同时采用RNA干扰技术以及与癌发生、侵袭等生物学特性有关的鉴定方法对HSP27进行了功能分析。

购买Luminespib 第一部分 人肝细胞性肝癌组织转移相关的蛋白质组学研究 本部分的研究目的是应用双向凝胶电泳(two-dimensional electrophoresis,2-DE)结合基质辅助的激光解吸离子化—飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption/ionization-time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)等蛋白质组学技术,对临床和病理上均发现有转移的HCC组织和未发生转移的HCC组织的全蛋白质差异表达谱进行分析,筛查在转移过程中发挥重要作用的差异蛋白分子。

选择在临床和病理上提示有转移和未发生转移的肝细胞癌组织各6例,提取肝癌组织总蛋白,应用非线性pH3～10,长24cm的固定pH梯度的IPG胶条和12.5%的SDS-PAG进行双向凝胶电泳分离总蛋白,每一例样本均分别进行2次双向电泳以保证重复性,用Image Master软件对两组的全蛋白质组表达谱进行差异分析。结果在相同条件下,转移组(M组)平均检测到1102±56(n=12)个
目的:探讨p38和p130蛋白的增龄表达变化与SAMP10小鼠快速老化伴脑萎缩病理特征的相关性,以及“益气调血,扶本培元”针法延缓衰老,改善学习记忆障碍的可能机理。 DAPT secretase溶解度 方法:采用westernblotting技术,以快速老化伴学习记忆障碍模型小鼠SAMP10为研究对象,以正常老化小鼠SAMR1为对照,观察R1与P10在2、4、6、8、10、12月龄阶段海马和皮层中p38、p130表达的增龄变化,以及“益气调血,扶本培元”针法对8月龄SAMP10海马和皮层p38,p130表达的影响。 结果:1.正常对照R1可见,p38和p130在海马和皮层的表达随增龄均呈平稳上升趋势。 Camptothecin研究购买 2.在P10海马和皮层中,p38表达总体上随增龄呈显著波动上升趋势;p130表达总体上随增龄呈显著波动下降趋势。两种蛋白变化初始期为4～6月龄,并于随后月龄持续存在波动现象。这与P10渡过生长期(4～6月龄)后出现明显衰老表型在时间上比较吻合。此外,两种蛋白的变化在时间上具有同步性,且变化趋势相反。因此p130和p38的增龄变化可能存在某种联系,并可能与SAMP10快速老化伴脑萎缩的形成直接相关。

3.在相同脑区不同月龄间,p38、p130含量变化在R1表现为差异小,变化平稳;而P10表现为差异大,变化剧烈。2月龄时R1和P10在海马、皮层两种蛋白的含量上就存在显著差别,推测这是导致后期两品系生物学差异的原因之一。 4.8月龄P10与R1相比,p38在P10海马和皮层表达普遍增高;p130在海马有所增高,而皮层明显降低。“益气调血,扶本培元”针法可全部和部分改善两种蛋白在P10两个脑区的含量,使之接近R1对照的水平。非穴虽有类似的改善现象,但作用不明显。 结论:p38和p130蛋白可能直接参与了SAMP10快速老化伴脑萎缩的形成过程。“益气调血,扶本培元”针法可以这两种信号途径上的关键蛋白为作用靶点,有效调节两者在海马和皮层的异常表达,从而起到延缓衰老,改善认知障碍的作用。
脑血管疾病损伤的脑保护与促进康复,降低致残率,恢复受损的机体功能仍是神经科学的前沿问题。目前临床上已知作用途径的治疗药物未能使脑病致残率获得有效降低。而“九五”、“十五”数项国家攻关课题研究显示了中药方剂及方中有效组分对脑损伤保护具有一定作用。 目的: 客观评价中药丹酚酸A对脑缺血损伤的神经保护效应,初步探讨丹酚酸A保护神经元的作用机制、可能途径和相关靶点,为研制中药神经保护制剂提供科学依据。 方法: 采用在体和离体相结合的综合评价方法,复制/建立大脑中动脉阻塞模型和缺氧/复氧损伤的细胞模型;以神经功能评分、脑梗塞指数、脑含水量、脑组织形态学等为评价指标,在体考察了丹酚酸A对急性脑缺血损伤的保护作用;集成流式细胞术、酶联免疫(ELISA)、RT-PCR等细胞分子生物学先进技术,以细胞活力、乳酸脱氢酶(LDH)、细胞存活率(台盼蓝排斥法)、早期凋亡率(FCM)、电镜超微结构、神经特异性烯醇化酶(NSE)/神经生长因子(NGF)、致炎因子(IL-1 β)作为评价指标,先后评价了丹酚酸A对缺氧/复氧损伤神经元和星形胶质细胞的作用;在此基础上,制备了星形胶质细胞四种条件培养液,对不同条件下中药干预星形胶质细胞产生的保护效应进行了比较和验证;最后以IL-1 β——p38MAPK——Bax为线索,对中药丹酚酸A神经保护作用的可能途径和相关靶点进行了初步探讨。 结果: 1 丹酚酸A能够明显改善急性脑缺血大鼠的神经行为缺损症状,显著减小梗塞指数,减轻脑水肿,且低剂量组(2.

CCK-8实验用来检测BIIB021对Eca109和Eca9706细胞系的生长抑制情况处于对数生长期的食管鳞癌细胞Eca109和Eca9706,计数并分别接种于96孔板中,加入BIIB021(浓度梯度为：OnM,65nM,125nM,250nM,500nM, 1μM,2μM)培养5天。用CCK-8试剂盒检测在此浓度梯度下,BIIB021对Eca109和Eca9706的生长抑制情况。细胞活力=(实验组的OD450-空白组OD450)／(对照组OD450-空白组OD450)×100。2.通过克隆形式试验检测BIIB021联合放疗对Eca109和Eca9706克隆形成能力的影响一定数目的Eca109和Eca9706接种在六孔板中,加入IC25浓度的BIIB021(Eca109:

获悉更多 97nM; Eca9706:33nM)培养16h后,分别接受2Gy,4Gy,6Gy,8Gy的单次剂量照射,4h后更换培养基。接种后的14天计数克隆形成(大于50个细胞数为一个克隆)。3.流式细胞术检测细胞的凋亡和周期(实验分为：对照组,单纯照射组,单纯药物组,药物联合照射组)单纯照射组照射剂量为6Gy,单纯药物组药物浓度为1μM,药物联合照射组用1μM BⅡO021培养16h后接受6Gy的单次剂量照射,均在处理24h后收集细胞,分别用凋亡和周期试剂盒检测Eca109和Eca9706的凋亡情况和周期分布。4.Western blotting用来检测放射抵抗相关蛋白pEGFR, pAkt, Raf-1和凋亡相关蛋白cleaved PARP的表达情况以及pEGFR和pAkt的表达情况随BIIB021培养时间长短(12h,24h,48h)的变化结果：1.BIIB021以剂量依赖的方式抑制食管鳞癌细胞Eca109和Eca9706的生长,并且Eca9706对BIIB021更敏感。2.BIIB021减弱了放射后食管鳞癌细胞Eca109和Eca9706的克隆形成能力,提高了放射敏感性。3.BIIB021联合照射组与单纯BIIB021处理组及单纯照射组相比,显著增加了食管鳞癌细胞的凋亡,增强了细胞G2期阻滞,处在G2期细胞对放射更加敏感。4. BIIB021联合照射组与单纯BIIB021处理组及单纯照射组相比显著下调了放射抵抗相关蛋白pEGFR,pAkt,Raf-1的表达,同时BIIB021联合照射组凋亡相关蛋白cleaved Docetaxel制造商 PARP的表达显著升高。pEGFR和pAkt的表达随BIIB021培养时间增加而下调。结论：1.通过上述途径,BIIB021增强了食管鳞癌细胞对放射治疗的敏感性。所有的实验结果表明,BIIB021不论是作为单独制剂还是联合放疗都在食管鳞癌细胞中发挥了强大的抗肿瘤能力。2.放射治疗是针对晚期不能手术切除的食管鳞癌患者的主要治疗手段,并且术前或术后放疗在提高食管鳞癌患者的局部控制和生存率中起到非常重要的作用,但是内在的肿瘤抗辐射大大降低了放射治疗的敏感性。本实验结果证明,新型可口服的HSP90抑制剂BIIB021,可以同时阻断多种与食管鳞癌发生发展相关的信号通路,无论是作为单药制剂还是放射增敏剂,都为食管鳞癌患者提供了更好的治疗策略。
目的:1.表达并纯化较高活性的TRAIL蛋白,优化表达条件。2.观察TRAIL对大肠癌细胞HCT116、SW480和SW620细胞增殖的影响,并对机制进行初步分析。方法:1.TRAIL的表达与纯化。扩大培养含p

ET-d-TRAIL质粒的大肠杆菌DH5a,IPTG诱导表达TRAIL蛋白。表达产物经Ni-NTA亲和层析和离子交换层析纯化。利用MTT法测定纯化产物对大肠癌细胞SW480增殖的影响。分别改变诱导剂IPTG的浓度和诱导时间,从而确定诱导TRAIL的最适条件。在亲和层析过程中采用两种洗脱TRAIL的方式,并改变透析的时间,对比以上条件对TRAIL活性的影响。2.初步分析TRAIL对HCT116、SW480和SW620的增殖的影响。在HCT116、SW480和SW620三种大肠癌细胞中分别加入0、100、200和400mg/ml的TRAIL,培养12 CI-1040制造商 h后,光镜下观察TRAIL对细胞形态的影响;MTT法测定TRAIL对细胞增殖的影响;用western blot检测三种细胞中DR5、caspase-3、caspase-6、caspase-7、caspase-8和XIAP的蛋白表达水平;转染caspase-8质粒至SW620细胞,进一步观察高表达caspase-8的SW620细胞对TRAIL敏感性。结果:1.确定最适诱导条件:TRAIL工程菌在培养4 h后进入对数生长期,在IPTG浓度为0.5 mmol/L条件下37℃诱导6 h,TRAIL的蛋白表达量占总蛋白的比例达到20%。2.纯化出纯度高于95%的可溶性TRAIL蛋白。3.在细胞生长处于对数生长期时分别加入0、100、200和400mg/ml的TRAIL并培养12 h。MTT实验显示HCT116的细胞活力分别为对照组的65%、28%、6%。SW480细胞的活力分别为对照组的85%、65%、42%。SW620的细胞活力分别为对照组的95%、94%、91%。4.

05)。 2.5 Celecoxib对MDA-MB-231细胞p65与DNA结合能力的影响 EMSA结果显示,在探针冷竞争反应中,正常的标记探针和NF-κB的结合条带会被100倍过量的未标记探针抑制;而在突变探针冷竞争反应中,正常的标记探针和NF-κB结合的条带不会被100倍过量的未标记突变探针抑制。结果提示,MDA-MB-231细胞中NF-κB处于组成性活化状态。 此外,与对照组相比,80μM的celecoxib作用24h后,MDA-MB-231细胞的DNA-蛋白质复合物区带明显变浅,提示celecoxib可以降低MDA-MB-231细胞中NF-κB

DNA的结合活性。 2.6 Celecoxib抑制MDA-MB-231细胞中凋亡相关分子Bcl-2的蛋白表达 Western blot分析结果显示,80μM的celecoxib能够明显抑制MDA-MB-231细胞中NF-κB下游Bcl-2分子的表达(P0.05)。 3.5过表达p65基因对MDA-MB-231细胞凋亡的影响 FCM检测结果发现,转染p65cDNA的MDA-MB-231细胞给予80μMcelecoxib共孵育48h后,细胞的凋亡率为18.53±2.51%,而空载体对照组细胞为31.21±3.29%,两者比较差异具有统计学意义(P0.05)。 3.6过表达p65基因对MDA-MB-231细胞侵袭性的影响 Transwell侵袭小室检测结果显示,转染p65cDNA的MDA-MB-231细胞培养6h后,基本没有细胞侵袭过matrigel胶,而在12h,实验组和对照组侵袭的细胞数无明显差异(P>0.05)。24h后可见转染p65cDNA的细胞克隆侵袭细胞数明显多于对照组,差异具有统计学意义(P
近年来2型糖尿病的发病呈快速增长趋势,目前估算到2030年全球糖尿病患病人数将超过3.5亿。由糖尿病引起的死亡人数仅次于心脑血管疾病、恶性肿瘤,被称为“第三杀手”,我国现有糖尿病人数目前居世界第二位。流行病学资料表明,随年龄增加2型糖尿病患病率也明显增加,是影响中老年人健康的主要疾病之一。与糖尿病相关的慢性并发症如心脑血管疾病、糖尿病肾病、糖尿病视网膜病变以及糖尿病神经病变是致死、致残的主要原因,严重威胁人类健康。胰岛素抵抗(insulin Silmitasertib分子重量 resistanse, IR)是肥胖和2型糖尿病早期和重要的发病机制,其定义为由于肝脏、脂肪和肌肉等靶组织对胰岛素生物效应的反应性降低。导致胰岛素抵抗的具体机制尚不十分清楚。骨骼肌是机体葡萄糖、脂质摄取和利用的器官,是胰岛素发挥作用的重要组织。 Danusertib小白鼠 遗传因素和环境因素均可诱导IR的发生,动物和人的实验均表明无论是通过脂质灌注,还是慢性的高脂饮食,血中游离脂肪酸(free fatty acids,FFA)升高均可导致胰岛素抵抗,而且不同类型脂肪酸作用不同,而饱和脂肪酸尤为重要,高脂是诱发IR的独立危险因素之一。长期高脂饮食或短期脂肪酸输入导致人或动物骨骼肌线粒体相关蛋白表达变化和功能异常。老年人、2型糖尿病患者、2型糖尿病一级亲属的骨骼肌线粒体代谢能力下降,而且胰岛素抵抗个体线粒体代谢的标志物的表达已经发生改变、出现线粒体功能下降,导致肥胖和脂质堆积,所以线粒体代谢的标志物在胰岛素抵抗和2型糖尿病发病机制中扮演重要作用。由此可见,骨骼肌线粒体功能紊乱可能是导致IR的一个重要原因,但具体机制尚不清楚。老年人易发生的IR可能与肌肉细胞内的线粒体作用减退或缺陷有关。

过氧化物酶体增生物激活受体γ共激活因子1α(peroxisome proliferator-activated receptorγcoactivator

1α,PGC-1α),是一种核转录共激活因子,可调节线粒体生物发生、糖代谢、脂肪酸氧化、胰岛素分泌等诸多生物过程。线粒体融合蛋白2(mitofusin 2,Mfn2),不仅促进线粒体的融合,维持线粒体结构完整性,而且还参与线粒体的代谢调节。核呼吸因子-1(nuclear respiratory factor-1,NRF-1)是一种由核基因组编码的,对线粒体基因组表达的复制转录和翻译过程中重要的酶及蛋白因子起调控作用,对维持线粒体结构与功能发挥重要作用。PGC-1α作为转录共激活因子可以调节Mfn2的表达和NRF-1的转录。因此,骨骼肌线粒体相关因子PGC-1α、Mfn2和NRF-1的表达异常可能导致骨骼肌线粒体形态和功能的改变,其中PGC-1α在线粒体功能和胰岛素抵抗中的作用成为近年来研究的热点。 研究发现高脂引起骨骼肌线粒体相关蛋白PGC-1α,Mfn2、NRF-1表达下降,同时伴有胰岛素信号通路相关蛋白的表达异常及胰岛素抵抗,说明骨骼肌线粒体功能和胰岛素抵抗关系密切,而且PGC-1α可能在调控线粒体功能和胰岛素抵抗方面发挥重要作用。目前假说认为血中FFA升高或上述各种原因导致的线粒体功能异常均影响了脂肪酸进入线粒体的氧化过程,从而导致长链乙酰辅酶A(long-chain Ipatasertib 花费 fatty acyl coenzyme A ,LCACoA)的堆积,甘油二酯(diacylglycerol ,DAG)生成增加,激活蛋白激酶C(protein kinase C ,PKC),进而抑制胰岛素受体底物-1(insulin receptor substrate-1 IRS-1)活性,干扰胰岛素信号传导系统,减低葡萄糖的转运,导致胰岛素抵抗的形成。PGC-1α作为重要的核转录共激活因子是否在高脂导致的线粒体功能变化、胰岛素抵抗中发挥重要作用,其机制是什么,目前国外尚无定论,国内鲜有报道。 本课题通过高脂饮食喂养老年大鼠,造成胰岛素抵抗模型,分析胰岛素抵抗状态下和罗格列酮(Rosiglitazone,RSG)干预后骨骼肌线粒体相关蛋白PGC-1α,mfn2、NRF-1的表达变化及相关关系,分析高脂饮食喂养老年大鼠线粒体功能和胰岛素敏感性的变化。采用脂肪酸孵育C2C12肌细胞,了解不同类型脂肪酸对骨骼肌PGC-1α表达的影响,寻找细胞水平研究PGC-1α作用机制的模型,并通过药物和小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)技术调节肌细胞PGC-1α的表达,分析线粒体相关蛋白和胰岛素信号通路相关蛋白的表达变化,探讨PGC-1α在高脂、线粒体功能和胰岛素抵抗中的作用机制及其上游调控因子,为研发防治胰岛素抵抗和2型糖尿病的药物提供新的作用靶点和理论依据。本实验内容主要包括以下四部分: 第一部分高脂诱导老年胰岛素抵抗大鼠骨骼肌线粒体相关蛋白的表达 目的:测定高脂饮食喂养及罗格列酮干预老年大鼠的胰岛素敏感性以及骨骼肌PGC-1α、Mfn2和NRF-1的表达变化,探讨高脂与线粒体功能、IR的关系。 方法:22-24月龄老年雄性Wistar大鼠40只随机分为2组:老年对照(OC)组16只、老年高脂(OF)组24只, 4-5月龄青年大鼠16只,为青年对照组(YC)。对照组给予基础饲料,热量组成:碳水化合物65.5%,脂肪10.3%,蛋白质24.

05);B组进一步分化为神经元的阳性率明显高于A、C组,差异有统计学意义(P0.05);半定量RT-PCR观察B组神经干细胞p38αmRNA表达明显高于A、C 2组;MTT法检测与半定量RT-PCR结果相似。结论人胚胎干细胞体外分化过程中,血管内皮生长因子促进神经干细胞分化的作用与p38MAPK通路无关,而VEGF通过激活p38MAPK信号通路,促进神经干细胞进一部分化为神经元。
目的探讨c-Jun氨基末端激酶通路(JNK)和p38通路在癫痫持续状态(SE)大鼠海马中的活性变化规律及其意义。方法建立氯化锂-匹罗卡品癫痫持续状态模型,在不同时间点用免疫组化法检测海马结构JNK和p38磷酸化状态,并观察组织病理学改变。结果对照组P-JNK极少活化而p38在海马各结构广泛活化。SE 30 min后JNK和p38在海马神经元强烈激活,2 h时达到高峰,6 h后各区均明显减少,12 h后降至基础水平,在所有时间点,JNK和p38在齿状回的活化程度均显著高于CA1和CA3区。海马结构各区可见到许多神经元发生变性和坏死。结论 JNK和p38信号转导通路在氯化锂-匹罗卡品致痫过程中被激活,并可能在发作后参与海马神经元损伤的病理生理过程。
全反式维甲酸(all-trans

retinoic acid,ATRA)诱导细胞分化与上调转录因子Krüppel样因子4(KLF4)表达有关,但目前对ATRA诱导KLF4表达的分子机制尚不清楚.为了研究ATRA在血管平滑肌细胞(VSMC)中诱导KLF4表达的分子机制,本研究观察ATRA对视黄酸受体α(retinoicacid receptorα,RARα)和KLF4表达的影响及RARα介导ATRA诱导KLF4表达所依赖的信号转导途径.实验结果显示,ATRA可显著诱导RARα和KLF4表达,用RARα拮抗剂Ro 41-5253阻断ATRA与受体相互作用后,ATRA诱导的KLF4表达受到显著抑制.用p38 确认细节 MAPK、ERK和Akt抑制剂阻断ATRA与RARα相互作用所激活的信号转导途径后,发现阻断p38 寻找更多 MAPK信号途径显著抑制ATRA诱导的KLF4表达,抑制ERK信号途径使ATRA对KLF4表达的诱导作用明显增强,抑制Akt信号途径不影响KLF4基因表达.表明RARα介导ATRA对KLF4表达的诱导作用,ATRA通过抑制ERK和激活p38

MAPK信号途径发挥其对KLF4基因表达的诱导作用.
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目的:探究诱导型一氧化氮合酶(iNOS)中药源抑制剂的抗炎机制。方法:iNOS在辅助因子存在情况下,将L-精氨酸转变为L-瓜氨酸的同时产生一氧化氮(NO),过量的NO将导致细胞损伤、组织坏死,进而促进炎症性疾病的发生和发展。结果:iNOS的表达与信号通路中的丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路、核因子(NF)-κB通路、蛋白激酶(PK)C通路、环腺苷酸(cAMP)依赖PKA通路、核激素受体过氧化物酶体增生物激活受体(PPAR)通路、磷脂酰肌醇三羟基激酶(PI3K)-蛋白激酶B(Akt)通路、JAK/信号转导及转录活化因子(STAT)通路、血红素加氧酶(HO)-1/一氧化碳(CO)通路均密切相关。结论:iNOS中药源抑制剂通过各种信号通路而发挥其抗炎作用。
研究显示黄连素具有调节机体糖脂代谢的活性。该文从胰岛素分泌和胰岛素信号通路作用、葡萄糖转运及代谢、低密度脂蛋白受体、AMP激酶活性、脂肪细胞分化及脂质代谢和能量代谢等方面探讨黄连素调节糖脂代谢及其联合调节的作用机制,并就其提示的临床应用前景及面临问题进行了综述。
内皮细胞激活是内皮细胞损伤的始动因素,是引起各种不同程度的炎症反应和细胞凋亡的前提条件 NLG919半抑制浓度 ;丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK) 是哺乳动物细胞中重要的信号转导通路,其中 p38MAPK 通路在细胞应激、细胞生长、凋亡和炎症等多种生理和病理过程中起重要作用,越来越引起业界的广泛关注,本文就 p38MAPK 信号通路及其与内皮细胞激活的相关性做一综述,旨在进一步对内皮细胞损伤引发心血管疾病研究提供参考资料。
疼痛是一种与组织损伤或潜在损伤相关的不愉快的主观感觉和情绪体验。病理性疼痛包括炎症性疼痛和神经病理性疼痛,是神经元可塑性变化的表现形式之一[1]。外周和中枢的敏感化是疼痛产生的病理基础,细胞内信号转导通路的激活和细胞的可塑性
阿尔茨海默病(Alzheimer’s

disease,AD)是老年痴呆最常见病因。临床以老年斑(senile plaques,SP)和神经纤维缠结(neurofibrillary tangles,NFTs)为特征,其病理变化以细胞外β淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ)沉积导致SP的形成及细胞内自我聚集的高度磷酸
目的:研究通窍止咳液增强顺铂对肿瘤细胞内p38的活性。方法:通过Western-Blot检测通窍止咳液对人鼻咽癌细胞CNE2、人肺癌细胞A549内p38活性的变化;通过MTT比色法检测通窍止咳液单用以及联合顺铂对CNE2、A549细胞生长的影响。结果:Western-Blot检测结果显示,通窍止咳液能够激活CNE2和A549细胞内p38,增高细胞内p38的磷酸化水平;MTT检测结果显示高浓度的通窍止咳液可以抑制CNE2、A549细胞的生长,通窍止咳液能增强顺铂对CNE2细胞的细胞毒作用,而对A549细胞则无此作用。结论:通窍止咳液增强顺铂的细胞毒作用可能与其激活p38有关,这一作用为逆转顺铂耐药提供了新的治疗方案。
AIM: To evaluate the efficacy and the safety of azathioprine (AZA) and buthionine sulfoximine (BSO) bylocalized application into HepG2 tumor in vivo.

As its treatment mainly involves surgery,radiotherapy alone is seldom reported in literature.Here we report a case of lowly malignant cranial IMT with intracranial invasion in a female patient. As surgery was not suitable,intensity modulated radiation therapy(IMRT) was administered.After radiotherapy,the cranial lesions tended to show efficacy.
肺癌是世界范围内常见的癌症,目前肺癌已经成为全球第一癌症杀手,每年全球肺癌的新发病例超过120万。肺癌一般分为小细胞肺癌(snall celllung cancer,SCLC)和非小细胞肺癌(non-snall celllung cancer,NSCLC)两种基本类型,中国的每年新发肺癌病例超过48万,其中NSCLC的构成比最高,
综述CXCL12(SDF-1)/CXCR4轴在肺癌发生、发展过程中调节肺瘤微环境与调控肺瘤进程的作用机制,以及中医药通过调控CXCL12/CXCR4生物轴抑制肿瘤细胞增殖与黏附、抗肿瘤血管生成、抗肿瘤转移作用的研究进展。
正如《2012年全球新药研发报告》第一部分所提及的,2012年有大量药物获得批准;而在上市新药中,相当一部分是用于治疗发病率较低的一些疾病的孤儿药。虽然这些药物不会成为”重磅炸弹”产品,但对于小范围的患者来说却是一大福音。这一发展方向顺应了制药业从通用型”重磅炸弹”药物生产转向个体化药物研发的趋势。许多制药公司将其作为解决专利悬崖问题的策略,原因在于2012年有大量专利到期药物都作为仿制药获批。该报告的第二部分总结了新药、生物仿制药及新上市的化学仿制药的新进展,以及制药行业内部如何通过战略性调整巩固其市场地位,如通过兼并并购、子母公司与产权转让等努力获得领先地位。这部分还包含了大量便于快速查阅的数据图表以及制药行业内的战略性调整的大致介绍。更多详细信息,例如作用机制、研究现状、药理学研究、药动学研究、临床研究发现及更新信息等可以查阅ThomsonReutersIntegritySM和ThomsonReutersCortellisTM数据库。
非小细胞肺癌(non-small

CP-868596 花费 GSK-3抑制剂 cell lung cancer,NSCLC)是成年人常见的恶性肿瘤之一。随着NSCLC分子生物学和新药开发研究的不断深入,基于分子标志物的靶向治疗已从实验室走到了临床,并在晚期NSCLC患者的治疗中取得了显著的效果。表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因、间变性淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase,ALK)基因、KRAS基因、BRAF基因是目前NSCLC靶向治疗研究的重要靶点,针对EGFR和ALK基因的靶向药物已相继被用于临床。
2010ASCO四大研究展示·2010,6,4—2010,6,8,ASCO在美国芝加哥召开,到会者来自世界各地的肿瘤学者3万余人;·6日13时整,一场规模空前的全体大会报告(plenary session)将本届ASCO年会推向高潮,4项重量级研究结果在3万与会者的关注中揭晓,三大领域的世界级专家即时给予了权威点评。
表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)吉非替尼和厄洛替尼是治疗晚期非小细胞肺癌的有效靶向药物,尤其是对于选择人群,如腺癌、女性和不吸烟者。研究表明,EGFR突变型患者有效率
目的个体化医疗(personalized/individualized

购买INCB028050 medicine)就是通过对个体携带的信息进行检测,制定针对某些疾病的预防和治疗策略,使患者获得最佳治疗效果的同时尽可能避免药物不良反应。如今,它己成为恶性肿瘤等重大疾病临床治疗的发展方向。方法本文通过介绍乳腺癌、肺癌、结直肠癌、淋巴瘤等几种常见肿瘤的个体化化疗、靶向治疗的研究现状以及肿瘤分子标志物的检测方法 ,阐述了国内外肿瘤个体化治疗的现状,以及肿瘤个体化医疗的新进展。结果与结论针对不同作用靶点的抗肿瘤药物层出不穷,不断总结和完善诊疗策略,必将实现真正的肿瘤个体化治疗。
本文对几种传统抗肿瘤药物,烷化剂、铂络合物、蒽环类以及破坏DNA的抗生素在肿瘤治疗中的应用进行简要介绍,随着对化疗药物作用机理研究的深入及药物合成提取技术的提高,许多新的抗肿瘤靶点和与之对应的抗肿瘤药物不断被研究出来并应用于临床,为抗肿瘤药物的研究带来了希望。
在肺癌领域,2013 ASCO会议覆盖了靶向治疗、化疗、免疫治疗及生物标志物的研究。现将本年度会议在肺癌方面的主要转化性研究进展摘述如下:1.肺癌分子靶点的多基因检测和筛查意义重大:有助临床实践和临床试验,能显著改善患者生存。主要报道有法国报道10000例的肺癌BM项目研究、美国LCMC项目的进展、美国Sloan-Kettering纪念医院(MSK)的肺鳞癌(MSK-SQC)项目进展,多数研究者引用了2012年的”癌症基因组图谱项目”(TCGA,The Cancer Genome Atlas Project)的结果。这些大样本的多基因的检测和筛查项目均得到类似的结果,凸显了多分子变异检测…
Objectives We aimed to investigate whether over-expression of miR-210, an oxide-related miR, could protect mesenchymal stromal cells (MSCs) against apoptosis induced by oxidative stress, and if so, what the potential mechanisms involved. Methods MSCs, derived from male SD rats, with forced expres…

One group of representative targeted oncogenic kinases,the receptor tyrosine

kinases(RTKs),has been associated with gastric cancer development.Trastuzumab,an inhibitor of ERBB2,has been approved for the treatment of gastric cancer,although other receptor tyrosine kinases,such as epidermal growth factor receptor,vascular endothelial growth factor,platelet-derived growth factor receptor,c-Met,IGF-1R and fibroblast growth factor receptor 2,are also activated in gastric cancer.The promising 此网站 results of the trastuzumab clinical trial for gastric cancer resulted in the approval of trastuzumab-based therapy as a first-line treatment for human epidermal growth factor receptor 2-positive patients.On the other hand,the trial examining bevacizumab in combination with conventional chemotherapy did not meet its primary goal of increasing the overall survival time of gastric cancer patients;however,a significantly higher response rate and a longer progression-free survival were observed in the bevacizumab arm of the trial.Other clinical trials,especially phaseⅢtrials that have tested drugs targeting

RTKs,such as cetuximab,panitumumab,gefitinib,erlotinib,figitumumab,sorafenib,sunitinib and lapatinib,have shown that these drugs have modest effects OSI-744 against gastric cancer.This review summarizes the recent results from the clinical trials of molecularly targeted drugs and suggests that further

improvements in the treatment of advanced gastric cancer can be achieved through the combination of conventional drugs with the new molecularly targeted therapies.
系统阐述非小细胞肺癌(NSCLC)患者EGFR-TKI耐药的分子机制及目前已知的治疗策略。资料来源于PubMed数据库及万方数据库。选取2005~2013年发表在核心期刊上的关于非小细胞肺癌EGFR-TKI耐药机制或耐药后治疗的文献,综合达成共识的数据资料,得出数据综合的结果和结论:目前已知的EGFR-TKI耐药的分子机制有T790M突变、C-Met基因扩增、BIM多态性缺失、K-ras基因突变、BRAF基因突变、EML4-ALK融合基因突变及转化为小细胞肺癌等,但针对各种耐药机制开发的药物多处于临床前或临床研究阶段,这些药物的研究为实现肺癌个体化治疗提供了可能。
Hsp90作为热休克蛋白家族中的重要一员,是一种对细胞生存所必需的分子伴侣,它发挥着稳定顾客蛋白构象、维持其功能的作用。许多顾客蛋白在肿瘤中处于过度表达或持续激活状态,与肿瘤的发生发展有着密切的关系。因此,Hsp90在近年的研究中倍受关注,已经发展为抗肿瘤治疗的良好靶点,目前已经有多个Hsp90抑制剂进入临床实验。近年随着肿瘤分子生物学的研究,肿瘤分子靶向治疗已取得明显成果,针对多种癌症已获得了多个用于靶向治疗的单克隆抗体或小分子化学物质,如用于治疗某些HER2阳性乳腺癌的曲妥珠单抗、用于治疗NSCLC的吉非替尼等。然而随着这些药物的应用,肿瘤耐药性不可避免的产生。多方面研究表明Hsp90抑制剂会引起与耐药相关的多个分子的降解,提示其在拮抗耐药方面具有重要的意义。本文就Hsp90分子抑制剂在拮抗肿瘤耐药方面的研究进行综述。
1前言一些遗传学确定的癌症依靠单一过度活跃的癌基因来增殖和生存,这种现象称之为”癌基因成瘾(oncogene 寻找更多 addiction)”,如慢性髓细胞性白血病的BCR-ABL融合基因,非小细胞肺癌(non-smallcell lung cancer,NSCLC)的表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因的活
1文献来源研究一:Zou HY,Li Q.An orally available small-molecule inhibitor of c-Met,PF-2341066,exhibits cytoreductive antitumor efficacy throughantiproliferative and antiangiogenic mechanisms[J].Cancer Res,2007,67(9):4408-4417.研究二:Tanizaki J,Okamoto I.

12±0.048，34.91±0.104，36.58±0.092与4.11±0.081；P＜0.05]；36h组凋亡率较24h组稍有增加，但差异无统计学意义，[34.91±0.104与36.58±0.092；P>0.05]。 2、缺氧引起PC12细胞凋亡率增加，[34.91±0.117与3.11±0.059；P<0.05]和存活率的显著降低[17.71±0.031与90.11±0.035；P<0.05]，显著降低缺氧引起的PC12细胞凋亡率的增加[34.91±0.021与21.72±0.081；P
目的： 肝纤维化的形成是机体对肝损伤的一种修复过程，其特征性改变是细胞外基质(extracellular matrix，ECM)在肝脏中过度沉积。肝纤维化的形成基础是肝星状细胞(hepatic stellate cell，HSC)的活化，活化的HSC细胞合成大量的ECM、平滑肌肌动蛋白（α-smooth

muscle actin,α-SMA)等。越来越多的研究发现Wnt信号通路与肝纤维化的发生有着密切联系，尤其是Wnt经典信号通路，也称为Wnt/β-catenin信号通路。β-catenin（β-连环蛋白)是一种多功能的胞浆蛋白，也能介导Wnt信号传导，是Wnt经典信号通路的关键因子。糖原合成酶激酶(GSK-3β)在Wnt经典信号通路中可使β-catenin磷酸化并参与其随后的降解过程，从而保持经典Wnt通路的静止状态。而SB216763是GSK-3β的抑制剂，使胞浆中β-catenin大量累积并入核，从而激活Wnt经典信号通路。本实验应用GSK-3β抑制剂抑制其在体外培养的大鼠HSC细胞中的活性，通过测定β-catenin的水平以及Wnt靶基因mRNA的表达预探讨经典Wnt信号通路在大鼠HSC细胞中的作用机制。 还有 近年来中药复方制剂治疗肝纤维化的研究取得了很大进展，肝复康是本实验室经过多年实验总结的中药复方制剂。本实验通过培养肝星状细胞并使用SB216763及中药肝复康药物血清干预，预探讨肝复康通过Wnt经典信号通路抗肝纤维化的机制。 PD0325901 方法： 1.细胞培养： 大鼠HSC-T6细胞株用含10%胎牛血清和DMEM培养基，于37℃，5%CO2混合气体的孵箱中培养，细胞达到良好状态后，所有细胞用无血清的DMEM培养基饥饿24小时后分组加药。细胞随机分五组加药，SB216763工作浓度依次为5,10,20,30,40umol/L(uM)，培养12小时后用比色微量滴定唑法(Microtitre tetrazolium，MTT)检测加药后细胞增殖情况，分析数据并选定SB216763最佳工作浓度为10uM、20uM。

将细胞随机分为以下五组：对照组(DMEM中加10％正常血清)；SB21676310uM组；SB21676320uM组；肝复康组(10％肝复康药物血清)；SB21676320uM加肝复康组(SB21676320uM基础上用10％肝复康药物血清干预)。 2.MTT:检测加药后大鼠HSC细胞增殖情况。 3.Quant Reverse Transcriptase(RT)-polymerase chain reaction(PCR): 检测大鼠HSC细胞中GSK-3β，β-catenin，CollagenI、Ⅲ，α-SMA，Wnt1， Wnt3a， Wnt10b

mRNA的表达。 4.免疫蛋白印迹(Western-blot): 检测大鼠HSC细胞中β-catenin蛋白的表达。 5.实验结果均采用SPSS13.0统计软件分析。 结果： 1.MTT实验结果 SB21676310uM组与SB21676320uM组肝星状细胞均较对照组增殖明显，肝复康药物血清组较对照组增殖明显受到抑制，差异有统计学意义(P<0.05)；同时，肝复康药物血清加SB21676320uM组细胞增殖程度于SB216763组相比显著下降，差异有统计学意义(P<0.05)；SB21676320(uM)加肝复康药物血清组相对于SB21676320uM组β-catenin表达量同样下降，差异有统计学意义(P
背景和目的： Selleck 抑制剂 Library 阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)是老年人常见的一种慢性进行性神经退行性疾病。AD的主要病理学特征是脑内生成有神经毒性的p-样淀粉样蛋白(β-amyloid, Ap), Aβ通过一系列的复杂分子病理机制导致大脑神经元细胞变性、缺失,最终导致认知功能损害,即脑内异常沉积的A6是造成AD记忆认知损伤的始动因素,是诱发AD的中心环节。糖原合成酶激酶3β(Glycogen sunthase kinase-3p,GSK-3p)是普遍存在于真核细胞中的一种多功能丝氨酸/苏氨酸激酶,是糖原合成的关键调节酶,是为数不多的通过磷酸化而失活的蛋白激酶。GSK-3β参与机体多个细胞信号传导通路,是PI3K/Akt信号通路下游分子,其中GSK-3β过度激活时促进淀粉样前体蛋白降解产生Ap,促进神经细胞骨架蛋白tau蛋白的异常过度磷酸化,加重神经元的退行性变,干扰正常的突触可塑性,进而加速阿尔茨海默病样病理过程。研究GSK-3β的调节机制对于治疗AD至关重要,抑制GSK-3β活性的过度升高,已成为AD治疗药物的新靶点。 淫羊藿苷(icariin, ICA)是小檗科淫羊藿属植物中的一种黄酮类化合物,近年来,关于淫羊藿苷在中枢神经系统的药理作用及其机制的研究日益增多,研究发现淫羊藿苷具有抗痴呆抗衰老、抗抑郁、改善缺血性脑损伤等作用。本研究基于PI3K/Akt信号通路,探讨ICA对AD细胞模型存活率及GSK-3β表达的影响,揭示出AD的部分发病机制以及ICA的作用机制,为指导临床应用和开发新药提供理论和实验依据。 方法： 以Aβ25-35孵育PC12细胞制备的AD细胞模型为对象,分为5组,分别为正常对照组、Aβ组、Aβ+ICA组、Ap+LY组、Ap+LY+ICA组(LY为PI3K/Akt信号通路的经典抑制剂),MTT法检测各组细胞的存活率,Western-Blot法检测各组的Akt、p-Akt、GSK-3β、p-GSK-3p的表达。 结果： (1)MTT法检测显示,与正常对照组比较,Aβ孵育后PC12细胞模型组的存活率明显下降,差异有显著性(P<0.01)；与Aβ组相比,加入ICA干预后细胞存活率明显增加,差异有显著性(P<0.01)；与ICA组相比,ICA+LY组细胞存活率明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。与Aβ组相比,ICA组的p-Akt水平、P-GSK-3β水平明显增高,差异有统计学意义(P<0.

因此,沙眼衣原体诱导产生的炎症因子是导致疾病的关键,沙眼衣原体可直接感染内皮细胞产生各种前炎因子,但其机制目前还不清楚.通过ELISA和免疫印迹等方法,检测到沙眼衣原体感染HeLa229细胞可产生IL-8,IL-1α,IL-1β,IL-6等前炎因子,并且沙眼衣原体感染可以主要激活宿主细胞MAPK/ERK和MAPK/P38信号通路.抑制MAPK/ERK和MAPK/P38信号通路显示,两条通路在沙眼衣原体感染过程中参与调节不同的炎症因子产生.MAPK/P38信号通路的活化参与调控IL-1α,IL-6的产生,而IL-8则同时受MAPK/ERK和MAPK/P38两条通路的调控.
目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(basic

fibroblastgrowth factor,bFGF)对人脐带静脉内皮细胞(human umbilicalvein endothelial cells,HUVECs)内游离镁离子浓度([Mg2+]i)的调节机制研究。方法我们采用荧光指示剂mag-fura-2,运用PTi阳离子测定系统动态测HUVECs的[Mg2+]i。结果经酪氨酸激酶阻断剂(tyrphostin A23和genistein)、3-磷脂酰肌醇激酶阻断剂(wortmannin和LY294002)、磷脂酶Cγ阻断剂(U73122)预处理,能阻断bF-GF诱导的[Mg2+]i增加。但经磷脂酶Cγ阻断剂无活性的类似物(U73343)和丝裂原活化蛋白激酶阻断剂(SB202190和PD98059)预处理,不能阻断bFGF诱导的[Mg2+]i增加。结论bFGF通过酪氨酸激酶/3-磷脂酰肌醇激酶/磷脂酶Cγ信号传递途径使细胞内的Mg2+库释放Mg2+,从而增加HUVECs的[Mg2+]i。
寻常型天疱疮是一种自身免疫性大疱性疾病,以角质形成细胞表面桥粒芯蛋白3成分与自身IgG抗体结合引起棘层细胞松解为特征。但抗体与自身抗原结合后如何进一步导致棘层松解仍然不清。近年来研究表明通过调节p38促分裂原活化蛋白激酶,Rho家族GTP酶,原癌基因c-myc,蛋白酶C和磷脂酶C信号途径可以防治天疱疮自身抗体导致的棘层松解。这些研究表明众多不同的信号分子在维持桥粒稳定中的重要作用。针对这些信号的抑制剂为寻常型天疱疮和其他桥粒相关的大疱性疾病提供了新的治疗思路。
在动脉粥样硬化发生、发展的不同阶段,血管平滑肌细胞表型转换具有重要且可能是不同的病理生理学意义。文章复习了近年动脉粥样硬化病损内膜中血管平滑肌细胞来源、血管平滑肌细胞表型转换的分子机制及鉴别不同平滑肌细胞表型的标志性分子,以期为深入理解动脉粥样硬化的发病机制和相关研究提供有益认识。
丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated

所以 Dactolisib分子重量 protein kinase,MAPK)是广泛表达的丝氨酸/酪氨酸激酶,在哺乳动物细胞多种信号转导通路中起重要作用。MAPK有4个主要亚族:ERK、p38MAPK、JNK和ERK5。p38信号通路是MAPK通路的一重要分支,它在炎症、细胞应激、凋亡、细胞周期和生长等多种生理和病理过程中起重要作用。本文就p38MAPK的分型、分布、信号通路的组成及其在法医损伤学领域中的应用现状做一综述,旨在进一步对组织损伤程度和伤后时间推断的法医病理学研究提供参考资料。
本文旨在观察p38MAPK与高糖诱导的肾小管上皮细胞向间充质细胞转变之间的关系。将雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为对照组、糖尿病组、胰岛素治疗组,用免疫组织化学、Westernblot检测p38MAPK和磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)蛋白表达。采用机械分离和酶消化获取SD大鼠肾小管节段,进行肾小管上皮细胞培养,将肾小管上皮细胞分为对照组、高渗组(20mmol/LD-mannitol)、高糖组(20mmol/LD-glucose)和SB202190(p38MAPK特异性抑制剂)+高糖组,处理72h后收集细胞,用免疫细胞化学检测α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth BTK inhibitor supplier muscle actin,α-SMA)、p-p38MAPK和Snail1蛋白表达,Western blot检测p38MAPK、p-p38MAPK、Snail1、转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、α-SMA和E-cadherin的表达,RT-PCR检测α-SMA和E-cadherin mRNA的表达。体内和体外结果均显示,高糖状态激活了p38MAPK,这种活化作用在体内可因胰岛素控制血糖而被消除,在体外可被p38MAPK特异性抑制剂SB202190显著抑制;高糖组α-SMA蛋白和mRNA在原代培养肾小管上皮细胞的表达较对照组分别增加12倍和8倍(P<0.01),SB202190处理组其表达则较高糖组分别减少67%和50%(P<0.