Deeper understanding of the pathobiology of non-small

cell lung cancer(NSCLC) has led to the development of small molecules that target genetic mutations known to play critical roles in progression to metastatic disease and to influence response to targeted therapies. The principle goal of precision medicine is to define those patient populations most likely to respond to targeted therapies. However, the cancer genome microtubule phosphorylation landscape is composed of relatively few “mountains” [representing the most commonly mutated genes like KRAS, epidermal growth factor(EGFR), and anaplastic lymphoma 寻找更多 kinase(ALK)] and a vast number of “hills”(representing low frequency but potentially actionable mutations). Low-frequency lesions that affect a druggable gene product allow a relatively small population of cancer patients for targeted therapy to be selected.
2009年美国临床肿瘤学会(American

Society of Clinical Oncology,ASCO)报道一种全新的分子靶向药物可选择性抑制DNA修复相关的关键酶——聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1[poly(ADP-ribose)polymerase-1,PARP-1],对三阴乳腺癌患者有效。这一突破性成果强烈预示以DNA损伤修复通路为靶标的分子治疗可能成为肿瘤治疗的新策略。DNA损伤修复是细胞
目的:研究非小细胞肺癌患者的间变性淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase,ALK)融合基因的表达情况和临床病理特点。方法:从北京大学第三医院随机选择了有随访资料的95例非小细胞肺癌患者,采用ALK+插入式抗体强化免疫组织化学法(intercalated

antibody-enhanced selleck产品 polymer,iAEP)和荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测患者ALK融合基因的表达情况,并分析ALK融合基因阳性患者的临床病理特点、生存期和EGFR/KRAS基因突变情况。结果:采用ALK+iAEP法共筛选出8例ALK阳性病例,其中4例经FISH法证实存在ALK融合基因,检出率为4.2%(4/95),其中2例女性肺癌患者的组织学类型是实体性肺腺癌伴印戒细胞形态,另2例男性肺癌患者是腺鳞癌。4例肺癌患者中3例为非吸烟者,均无EGFR/KRAS基因突变,且均存活,其中有2例患者已存活超过5年。结论:ALK+iAEP法较常规ALK免疫组织化学法能明显提高肺癌患者ALK的检出率,可以作为初筛ALK阳性病例的方法,且阳性细胞的比例较阳性强度更重要。ALK融合基因在非小细胞肺癌患者中的检出率较低(<5%),同时可能提示预后较好。
棘皮动物微管结合蛋白4(echinoderm microtubule associated protein-like 4,EML4)与间变淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase,ALK)形成的融合基因,被认为是非小细胞肺癌(NSCLC)新的分子靶点。EML4-ALK融合基因的发生率为3%~11%,该融合基因在年轻、腺癌、不吸烟或轻度吸烟的NSCLC患者中发生率较高,表达阳性者可以受益于ALK抑制剂(如克唑替尼)的治疗。本文重点阐述NSCLC中EML4-ALK融合基因的生物学特性、检测方法、临床特征和治疗方式。
目的研究克里唑替尼的合成工艺。方法以2,6-二氯-3-氟苯乙酮为起始原料,经还原、手性拆分、Mitsunobu反应、还原、溴代得中间体(R)-5-溴-3-(1-(2,6-二氯-3-氟苯基)乙氧基)-吡啶-2-胺,然后该中间体与1-(N-Boc-4-哌啶基)吡唑-4-硼酸频哪醇酯经Suzuki反应、脱除Boc保护基得到目标化合物克里唑替尼。结果与结论目标化合物的结构经1H-NMR、13C-NMR、MS及IR确证。总收率达14.

观察小鼠体质量、疾病活动度、单位长度结肠质量、结肠病理损伤程度及结肠上皮细胞凋亡情况,以评价17-DMAG对小鼠溃疡性结肠炎病程发展的影响.结果:3%DSS连续饮入5 d后,模型组小鼠较正常对照组小鼠体质量减轻,疾病活动度、单位肠道结肠重量、结肠病理评分及结肠上皮细胞凋亡增加.与PBS治疗组相比,17-DMAG治疗5 d后,结肠炎小鼠体质量降低程度(90.9%±7.78%vs 81%±5.44%,P<0.01)显著减少.结论:17-DMAG可减轻DSS诱导的小鼠溃疡性结肠炎,其可能通过抑制结肠上皮细胞的凋亡而发挥作用.
酪氨酸激酶抑制剂(TKIs)已成为治疗慢性粒细胞白血病的首选治疗药物,目前3种TKIs可用于一线选择,如何选择一线TKIs、当治疗失败或不耐受时又如何转换治疗、如何进行分子学监测和及时判断治疗失败的高危患者仍是困扰临床医生的一些问题。其他慢性骨髓增殖性肿瘤中除Janus激酶(JAK)突变以外很多新的基因突变被发现,(JAK)抑制剂ruxolitinib已应用于骨髓纤维化的治疗,其他多种JAK抑制剂也已进入临床试验。其剂量及安全性以及如何最大限度减少骨髓抑制是临床医生面临的问题。现就上述内容做一综述。
胃癌是消化系统最常见的恶性肿瘤之一.尽管近年来世界范围内胃癌的发生率和死亡率在下降,但我国胃癌的发病率仍居于恶性肿瘤第2位,死亡率居第3位.手术切除是胃癌首选治疗方法,但由于缺乏典型早期症状,多数患者就诊时已处于中晚期,因此效果并不理想.过去几十年,大量研究发现一系列涉及胃癌发生发展的驱动基因,以之为基础的分子靶向药物也不断出现,很大程度上提高了胃癌治疗的有效率,对指导胃癌的个体化治疗发挥了重要作用.本文就近年来在胃癌的分子靶向药物治疗方面的研究进展做一综述.
恶性肿瘤是一种多发病,常见病,严重威胁着人类的生命健康。在手术、放疗、化疗这三种主要治疗手段中,放疗因其适应证宽、疗效较好而有着不可置疑的重要地位。然而在治疗过程中,依然存在着辐射抵抗和辐射耐受现象,大大降低了放射治疗的疗效。因此提高肿瘤的放疗敏感性已成为目前研究的重点和热点。本文就近年国内外学者对提高肿瘤放疗敏感性问题的研究进展做一述评。
目前,胃癌是全球癌症死亡的第二大原因。虽然医疗可以改善进展期胃癌(advanced

selleck化学药品 gastric cancer,AGC)患者的生活质量和延长患者生存期,但在过去二十年中,胃癌的治疗并没有取得显著的进展。因此,AGC最优的标准一线化疗方案仍是有争议的,而且大多数化疗药物的作用是局部和短期的,疾病晚期患者的预后非常差,中位存活期仅为12个月,只有10%的患者生存期可以超过2年。Trastuzumab以及最近的Ramucirumab所获得的生存改善,证明靶向和生物治疗的前景,以及胃癌中分子肿瘤特征的重要性。本文回顾了胃癌中最常发生的基因改变,总结了胃癌治疗中获得成功以及研究失败的靶向药物,并且强调了正在进行的试图将生物知识转化为改善临床结局的研究,以引起业界对这些研究结果的关注。
Epithelial-to-mesenchymal 那个 transition(EMT) is defined as the transformation YM155 of an epithelial cell into a spindle cell with the loss of membrane E-cadherin expression and the gain of mesenchymal markers positivity. In the field of colorectal cancer(CRC), first data about EMT was published in 1995 and more than 400 papers had been written up to March 2016. Most of them are focused on the molecular pathways and experimentally-proved chemoresistance. In the present article, an update in the

field of EMT in CRC based on the review of the literature and personal experience of the authors is presented. The information about the molecular and immunohistochemical(IHC) particularities of these processes and their possible role in the prognosis of CRC were also up-dated. This article focuses on the IHC quantification of the EMT, the immunoprofile of tumor buds and on the relation between EMT, angiogenesis, and stem cells activation. The EMT-induced chemoresistance vs chemotherapyor radiotherapy-induced EMT and cellular senescence was also synthesized for both conventional and targeted therapy. As a future perspective, the EMTangiogenesis-stemness link could be used as a possible valuable parameter for clinical follow-up and targeted therapeutic oncologic management of patients with CRC. Association of dexamethasone and angiotensin converting enzyme inhibitors combined with conventional chemotherapies could have clinical benefits in patients with CRC.

However, until today the milestone of treatment for pancreatic cancer remains chemotherapy combinations, without predictive or monitoring tools existing to optimize therapy. This review analyzes the state-of-the-art treatments,

promises and limitations of targeted therapies, ongoing trials and future perspectives, including potential role of microR NAs as predictive biomarkers.
目的比较免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)和荧光原位杂交(fluorescent in situhybridization,FISH)技术在检测肺腺癌中ROS1蛋白表达和融合基因的差异性和一致性,评估IHC在临床上的应用价值。方法应用IHC和FISH技术对332例肺腺癌中ROS1蛋白表达和融合基因进行检测,比较两者检测的结果和相关性,并探讨ROS1融合基因与临床病理特征之间的关系。结果 332例肺腺癌中FISH阳性者13例,阴性者319例,ROS1融合基因阳性率为3.9%;ROS1蛋白表达结果:0者312例,1+者2例,2+者5例,3+者13例,ROS1蛋白过表达率为6.0%;经FISH检测312例ROS1蛋白表达为0的标本无ROS1融合基因,2例1+的标本中也无ROS1融合基因;5例2+的标本中有2例ROS1融合基因,13例3+的标本中11例有ROS1融合基因;IHC检测0和1+、2+、3+标本FISH检测阳性符合率分别为0(0/314)、40%(2/5)和84.6%(11/13);IHC检测ROS1蛋白为2+~3+的标本中72.2%(13/18)显示ROS1融合基因,0~1+患者中无1例有ROS1融合基因(Kappa系数=0.831,P
[目的]研究c-Met抑制剂PHA665752联合5氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-Fu)对人结肠癌细胞SW620生长的抑制作用及机制。[方法]选取48只4周龄的雄性裸鼠皮下接种人结肠癌细胞SW620,建立裸鼠移植瘤模型,随机分为对照组(2.5%二甲亚砜稀释液隔日用药)、5-Fu组(40mg/kg

没有 一般 5-Fu每隔3日给药)、PHA组(25mg/kg PHA665752隔日给药)、5-Fu+PHA组(40mg/kg 5-Fu每隔3日给药+25mg/kg PHA665752隔日给药)各12只。免疫组织化学SP法检测瘤体组织内的E-cadherin和Ki-67蛋白表达情况,TUNEL法检测细胞凋亡情况。[结果]治疗结束时,5-Fu组、PHA组、5-Fu+PHA组3组裸鼠的体重和瘤体体积均明显低于对照组(P<0.05),且5-Fu+PHA组裸鼠的瘤体体积显著低于5-Fu组、PHA组(P<0.05)。5-Fu组、PHA组、5-Fu+PHA组3组裸鼠的E-cadherin蛋白OD值显著高于对照组(P<0.05);5-Fu+PHA组裸鼠的E-cadherin蛋白OD值显著高于5-Fu组、PHA组(P<0.05);5-Fu组、PHA组、5-Fu+PHA组3组裸鼠的Ki-67蛋白OD值显著低于对照组(P<0.05);5-Fu+PHA组裸鼠的Ki-67蛋白OD值显著低于5-Fu组、PHA组(P<0.05);5-Fu+PHA组裸鼠的AI值显著高于5-Fu组、PHA组(P<0.05)。[结论]c-Met抑制剂PHA665752联合5-Fu对人结肠癌细胞SW620生长的抑制有协同作用,其机制可能与上调E-cadherin、下调Ki-67表达有关。
目的建立对吉非替尼(gefitinib)耐受的NSCLC细胞株,并观察其药理学特性。方法采用HGF和浓度递增的gefitinib处理HCC827细胞以诱导细胞耐药;MTT法测试细胞活力和药物敏感性;克隆形成和Edu染色验证gefitinib对细胞的生长抑制作用;qRT-PCR和Western

点击此处 blot实验检测细胞中c-Met表达。结果 HGF的使用可缩短HCC827GR耐药细胞的诱导时间;gefitinib可明显抑制HCC827亲本细胞的细胞活力、克隆形成和细胞增殖,而对HCC827GR细胞的生长抑制作用很弱;HCC827GR细胞c-Met高表达,对c-Met抑制剂高度敏感。结论成功并高效诱导了对gefitinib耐药的HCC827GR细胞,该细胞生长依赖c-Met蛋白活性,对c-Met抑制剂较敏感,可作为c-Met抑制剂的表型筛选模型。
软组织肉瘤约占成人恶性肿瘤的1%,儿童肿瘤的10%。手术一直是局限性原发软组织肉瘤的首选治疗,近20年来随着术前和术后放疗的应用,手术已趋于保守且术后复发率降低,但仍有约40%~50%的患者最终会发生远处转移,另有约10%的患者在确诊时即已发生转移;化疗药物虽经过数十年的发展,但目前在软组织肉瘤治疗中常用的蒽环类药物、异环磷酰胺、顺
李进,教授、主任医师、博士生导师。复旦大学附属肿瘤医院肿瘤内科主任,胃癌多学科综合治疗组首席专家,复旦大学肿瘤医院临床药物研究机构负责人,上海市化疗质控中心主任。亚洲肿瘤分子靶向治疗继续教育委员会委员,国家卫生部肿瘤医师资格考试委员会委员,中国临床肿瘤学会秘书长。
晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的若干治疗方案及新靶向药物目前正在评价中。本文详细讨论了表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)、血管内皮生长因子受体(VEGFR)抑制剂和EML4-ALK抑制剂在一、二线治疗NSCLC中的重要性,概述了分子检测(EGFR突变、KRAS突变、EML4-ALK融合基因、EGFR表达)的含义以及在NSCLC治疗领域的未来前景。
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目的探讨NSCLC组织中棘皮动物微管样蛋白4-间变淋巴瘤激酶(EML4-ALK)融合基因与切除修复交叉互补蛋白1(ERCC1)和核苷酸还原酶亚单位M1(RRM1)mRNA表达的关系。方法应用实时荧光定量PCR方法检测257例NSCLC组织中EML4-ALK基因以及ERCC1和RRM1 mRNA的表达。结果 NSCLC组织中EML4-ALK融合基因阳性率占4.28%(11/257),在不吸烟患者中较高(P0.05);NSCLC组织中,EML4-ALK融合基因阳性与RRM1 mRNA表达水平无关(P>0.

324-390),其亲和指数Kd值约2nM,表明其亲和力较差。另外,scFv78分子量小,容易经肾脏排泄,血浆半衰期短,限制了其在早期特异性诊断和治疗等方面的应用。 本实验为了提高TEM1特异性抗体的亲和力与延长其在血液中的半衰期。我们构建了一系列新的scFv78多价抗体衍生物,包括二聚体Fc融合蛋白(来自hu

IgG1)(78Fc),四聚体CH2融合蛋白(78CH2),二聚体CH3融合蛋白(78mb)和二聚体的CH1-铰链区融合蛋白(78F(ab’)2),以便从中发现温度稳定和血清稳定性更好以及亲和力更高的抗体；通过瞬时转染293F细胞并且对培养上清进行亲和纯化获得这些蛋白；利用活细胞ELISA对这些蛋白进行亲和力的分析；同时,在动物体内对上述5个蛋白的血液代谢动力学进行检测；并利用近红外荧光成像技术对筛选出的最佳候选蛋白进行了体内成像检测,利用细胞杀伤实验和成管实验,观察其体外选择性地杀伤TEM1阳性表达细胞的效果。实验结果显示：与我们前期工作发现的scFv78相比,本实验构建的78Fc亲和力(Kd=0.14±0.01nM)增加了约15倍；动物体内代谢动力学结果表明78Fc的慢相半衰期约5.1小时；体内功能分析表明78Fc不针对Naive鼠的正常器官,而只是针对体内TEM1+肿瘤；近红外荧光成像技术结果显示78Fc在鼠体内只靶向TEM1阳性表达的细胞；最后78Fc-MMAE可以在体外选择性地杀伤TEM1阳性表达细胞。

3-Methyladenine浓度 综上所述,我们可以初步认为,通过将scFv78和Fc段融合后,提高了该蛋白的稳定性及亲和力,血液动力学结果表明78Fc有相对长的血清半衰期,可以用来做成像的探针。体内近红外荧光成像技术,体外细胞杀伤实验与成管实验与也证实其具有较高的特异性。因此,我们认为TEM1是一个成像与治疗的候选基因,可能为卵巢癌和其它癌症的靶向诊断与治疗提供新的思路；而78Fc可以为卵巢癌的早期诊断和治疗提供可能。
目的： 通过沉默或激活PC-9细胞(携带EGFR基因19外显子突变的NSCLC细胞株)中的内源性FGF2表达,同时添加吉非替尼与外源性FGF2,诱导PC-9细胞产生针对EGFR-TKIs快速获得性耐药的状态,筛选出FGF2介导的EGFR-TKIs快速获得性耐药的细胞模型,以进一步明确FGF-2信号通路介导EGFR-TKIs快速获得性耐药这一全新的耐药模式中所涉及的分子机制。 研究方法： 1.构建编码靶向FGF2基因shRNA及基于PAS (PCR-based Accurate Synthesis)的慢病毒载体,包装慢病毒,感染人肺癌细胞PC-9,以荧光定量PCR检测FGF2基因在mRNA水平的变化,以western blot检测FGF2蛋白表达水平的变化,筛选出FGF2沉默表达/高表达的细胞株； BMN673 2.PC-9细胞针对EGFR-TKIs快速获得性耐药状态的诱导及鉴定：对FGF2沉默表达(PC-9-FGF2-KD)或过表达细胞株(PC-9-FGF2-OE)单用吉非替尼或联用外源性FGF2,筛选出耐药细胞株。进一步用相关的生物学指标验证其耐药属性,生物学指标检测包括：(1)以MTS法检测细胞增殖情况；(2)以AnnexinV/PI凋亡检测试剂盒检测时的细胞凋亡情况,以PI单染法检测细胞周期分布情况；(3)软琼脂实验测定细胞锚定非依赖生长的影响；(4)Transwell法测定细胞迁移和侵袭能力；(5)实时荧光定量PCR法检测获得性耐药相关突变T790M突变和cMET扩增拷贝数。

Selleckchem SB 715992 3.以Affymetrix人全基因组3′IVT芯片检测PC-9-NC+FGF2、PC-9-FGF2-KD+FGF2、PC-9-FGF2-OE+FGF2,以及空白对照的PC-9细胞的差异基因表达改变。 结果： 1.采用慢病毒载体介导的转基因方法构建了FGF2基因沉默和FGF2基因高表达的PC-9细胞,Western Blot检测进一步在蛋白水平对细胞内FGF2的表达改变进行了验证,成功筛选出稳定的FGF2基因沉默(PC-9-FGF2-KD)和FGF2基因高表达(PC-9-FGF2-OE)的PC-9细胞株； 2.在FGF2基因过表达的PC-9细胞株(PC-9-FGF2-OE)及给予外源性FGF2的PC-9细胞株中均观察到细胞活力的增加,提示内外源性的FGF2刺激均有可能诱导出PC-9细胞针对EGFR-TKIs的快速获得性耐药；细胞生物学检测进一步表明PC-9-FGF2-OE+FGF2细胞株中出现显著的细胞凋亡率下降、细胞增殖分裂加快、细胞迁移和侵袭能力增强等耐药生物学行为,证实该细胞模型为FGF2介导的EGFR-TKIs快速获得性耐药的稳定的NSCLC细胞模型； 3.芯片检测发现PC-9-FGF2-OE+FGF2组细胞与PC-9-NC+FGF2组相比较而言,主要产生了PI3K-AKT通路、MAPK通路、ErbB通路和VEGF通路的上调,其中PI3K-AKT信号通路对FGF2介导的EGFR-TKIs快速获得性耐药的发生机制可能具有重要意义。 结论： 1.成功构建出FGF2介导的EGFR-TKIs快速获得性耐药的稳定的NSCLC细胞模型,为进一步揭示FGF-2信号通路介导EGFR-TKIs快速获得性耐药的分子机制奠定了研究基础； 2.