PTEN:随着胶质瘤病理级别的升高,PTEN蛋白的表达阳性率分别为Ⅰ级77.27%(17/22)；Ⅱ级66.67%(14/21)；Ⅲ级46.15%(6/13)；Ⅳ级37.50%(3/8)。脑胶质瘤低度恶性组阳性率为72.09%(31/43)与高度恶性组阳性率为42.85%(9/21)差异具有显著性。2.p38MAPK：随着胶质瘤病理级别的升高,p38MAPK蛋白的表达阳性率分别为Ⅰ级22.73%(5/22)；Ⅱ级39.10%(8/21)；Ⅲ级53.85%(7/13)；Ⅳ级75.00%(6/8)。脑胶质瘤低度恶性组阳性率为30.23%(13/43)与高度恶性组阳性率为61.90%(13/21)差异具有显著性。

并且 3.脑胶质瘤组织中PTEN蛋白表达与p38MAPK蛋白表达之间有显著性差异,两者表达呈负相关。 结论 1. PTEN在正常脑组织全部表达,随着胶质瘤恶性程度的增高其阳性表达率逐渐降低,PTEN表达与胶质瘤恶性程度密切相关。 2. p38MAPK在正常脑组织中不表达,随着胶质瘤恶性程度的增高其阳性表达率逐渐升高,p38MAPK表达与胶质瘤恶性程度密切相关。 3. PTEN和p38MAPK在人脑胶质瘤中的表达呈显著负相关性,p38MAPK在胶质瘤的发生发展中受到PTEN基因的负反馈调节。PTEN和p38MAPK可能成为临床判断胶质细胞瘤恶性程度,侵袭性及预后的有效参考指标,并可能成为胶质瘤靶向性治疗研究的新方向。
背景:肝细胞癌(HCC)是一种常见的恶性肿瘤和全球范围内癌症的主要死亡原因之一。最近的流行病学数据表明,不仅在亚洲和非洲,而且在北美和欧洲,肝癌的发病率都呈现持续上升的趋势,而且在未来十年还将如此。HBV感染是肝癌的重要致病因素。尽管安全有效的HBV疫苗得到广泛应用,但慢性乙肝病毒(HBV)感染仍然是HCC最主要的致病因素,超过一半的HCC患者是HBV慢性携带者。亚洲和北美的研究显示,HBsAg携带者相对于非HBV感染人群,肝癌发生风险增加了25-37倍。肝癌预后一般不佳,而且确诊时往往都为晚期,给手术及局部治疗带来相当困难,而且肝癌对化疗具有相当的抵抗。HBV编码的X蛋白在HBV的致癌机制中扮演着重要的角色,在前期的相关研究中已被进一步证实,然而HBx对肝细胞癌变后的进一步发展是否有促进作用,以及相关的机制还不十分清楚,因此对HCC发生发展的分子机制的深入研究,有望寻找到更多的关键性分子,为临床靶向治疗提供理论依据。

可能 目的:观察乙型肝炎病毒X蛋白对肝癌细胞中丝裂原活化蛋白激酶激酶3(MKK3)及其下游分子p38丝裂酶原活化蛋白激酶(p38MAPK)的表达的影响,探讨相关的信号转导机制,及其对肝癌细胞生物学行为的影响。 方法:分别将质粒pCDNA3.1及pCDNA3.1-HBx重组质粒经脂质体介导转染入人肝癌细胞株HepG2,经G418筛选培养,并用反转录PCR和Western blot鉴定,获得表达X蛋白的稳定细胞株HepG2-HBx和阴性对照细胞株HepG2-pCDNA3.1,同时以HepG2细胞株作空白对照。通过RT-PCR和Western blot检测上述三种细胞株中MKK3、p38MAPK在mRNA水平和蛋白水平的表达变化,并用细胞免疫荧光检查磷酸化p38MAPK蛋白在细胞浆及细胞核中的变化;通过MTT实验检测三种细胞株的增殖情况。采用SPSS12软件进行统计学分析。 ABT-199 花费 结果:MKK3在mRNA和总蛋白水平的表达在HepG2-HBx中均高于其他两组,其他两组无明显差异;p38MAPK在mRNA和总蛋白水平无明显差异,而其蛋白磷酸化水平和其在核蛋白中的表达在HepG2-HBx中较其他两组升高;细胞免疫荧光实验可见,HepG2-HBx细胞中,磷酸化的p38MAPK含量较其他两种细胞丰富,细胞核中的p38MAPK也明显多于其他两组细胞。在MTT实验显示,HepG2-HBx细胞较其他两组细胞有更强的增殖能力,尤其在转染72小时后更为明显。

结论:HBx可以通过上调肝癌细胞中MKK3的表达,促进p38MAPK磷酸化和入核,从而进一步激活下游分子发挥生物活性。p38MAPK通路在HBx促进肝癌细胞的增殖中发挥重要作用。HBx的这一作用可能是导致HBV相关性肝癌与非HBV相关性肝癌临床特点及肿瘤生物学差异的机制之一。
Background Fluoxetine has been studied to activate extracellular signal-regulated kinase 1/2 (ERK 1/2) but not extracellular signal-regulated kinase 5 (ERK 5) in specific which sequences has been found to resemble with ERK 1/2. Objective To investigate the effect of fluoxetine to extracellular signal-regulated kinase 5 (ERK5) on mouse embryonic hippocampus neural stem cell (NSCs) inhibited by BIX02188, as novel mitogen-activated protein kinase kinase 5 (M EK 5) selective inhibitor. Methods In this study we examined the affectivity of BIX02188 as novel selective MEK 5 inhibitor in NSCs with nerve growth factor (NGF) as stimulated agent. Later, we used MEK 5 selective inhibitor BIX02188 and mitogen-activated protein kinase kinase 1/2 (MEK 1/2) selective inhibitor PD98059 to inhibit NSCs at MEK 1/2 and MEK 5 respectively and stimulated phosphorylation of both ERK 1/2 and ERK 5 by fluoxetine.

MTS检测WP1066对骨髓瘤细胞的增殖抑制作用。 8.流式细胞仪检测WP1066对骨髓瘤细胞的诱导凋亡作用以及western blot及MSD检测凋亡相关基因表达变化。 结果 1. RT-PCR结果表明骨髓瘤细胞表达TLRs mRNA包括TLR 1-2,4-7和9,本课题重点研究TLR4,细胞株株MM.1S、MM.1R和ARP-1细胞表达TLR4,而U266细胞表达不明显,同时,用PE染色的TLR 4流式抗体检测了各细胞TLR4的表达情况,根据TLR 4峰的右移程度来判断表达的高低,TLR4峰右移越明显,则表明蛋白表达越高。结果发现MM.1S. MM.1R和ARP-1细胞明显表达TLR4,而U266细胞表达不明显。这个流式结果从蛋白角度表明TLR 4表达在细胞表面,而且我们还证实TLR4蛋白同时在原代骨髓瘤细胞表达。 2.TLR4的配体LPS (0、1、2、4μg/ml)刺激MM细胞后48h后,TLR4阳性表达的MM细胞株MM.1S、MM.1R和ARP-1细胞出现明显增殖,而TLR4表达阴性的MM细胞株U266增殖不明显。我们先用LPS(2μg/ml)刺激4 h,再加入阿霉素0.4μg/ml刺激24 h,最后AnnexinV /P I双染色流式检测,结果发现MM.1S和ARP-1对阿霉素诱导的凋亡有明显的抵抗作用,MM.1S细胞经LPS刺激后,阿霉素诱导的凋亡率从(79.01±15)%降至(38.73±8.5)%(P0.05],L PS不能保护阿霉素对U 266的诱导凋亡作用。而且LPS诱导细胞周期改变,LPS 为什么 (2μg/ml)处理细胞12、24和48小时后,细胞G0/G1期细胞明显减少,S期细胞明显增多。 3.TLR4的配体LPS诱导MM细胞株MM.1S和ARP-1细胞MAPK信号家族因子ERK、JNK和p38磷酸化,并增加核转录因子NF-κB蛋白表达增加,呈时间依赖,我们使用LPS作用细胞20、60和180min,结果发现LPS作用细胞20min即出现ERK和JNK磷酸化,而p38磷酸化在LPS作用细胞60min后明显,而且我们使用ERK1/2抑制剂U0126(25μM),JNK抑制剂SP600125(50μM)和p38抑制剂SB20358

(50μM)作用MM.1S细胞1小时后,LPS作用细胞48小时检测细胞增殖,我们发现LPS促进细胞增殖作用依赖MAPK信号通路。 4.使用real-time PCR方法检测了LPS对MM细胞株MM.1S细胞免疫调节分子B7-H1、B7-H2、CD40、VEGF和TGF-β的表达,结果发现LPS明显增加B7-H1和B7-H2的表达,少量增加CD40表达,TLR4活化的骨髓瘤细胞抑制健康供者外周血T细胞增殖。 5.TLR4的配体LPS (2μg/ml)作用MM细胞株MM.1R、MM.1S、ARP-1和U266细胞48小时,ELISA检测细胞上清IL-6、IL-12和IL-18分泌,结果发现LPS促进MM.1R、MM.1S和ARP-1细胞IL-18分泌,促进ARP-1细胞IL-6分泌,而对IL-12分泌无明显影响。而且我们进一步证实LPS对IL-18分泌的影响通过TLR4和MAPK途径。 6.研究发现在骨髓瘤细胞株MM.1S、ARP-1和U266细胞,U266细胞STAT3持续激活,而MM.1S和ARP-1在自然情况下无STAT3激活。我们选择MM.1S和ARP-1细胞株,应用一整套细胞因子和生长因子,包括EGF 50ng/ml、bFGF 20ng/ml、G-CSF 20ng/ml、Erythropoirtin Depsipeptide半抑制浓度 10 IU/ml, IFNa-2a 50000IU/ml, IFNβ20ng/ml, IFNγ20ng/ml, IL-220ng/ml、IL-420ng/ml、IL-650ng/ml、IL-720ng/ml、IL-8 20ng/ml、IL-10 50ng/ml、IL-12 20ng/ml、IL-15 20ng/ml、IL-16

20ng/ml、IL-20 20ng/ml和IL-22 20ng/ml分别在细胞血清饥饿状态刺激30分钟,结果发现细胞因子IL-6、IFNα和IFNβ促使骨髓瘤细胞STAT3和STAT5磷酸化,而且我们还比较了血清饥饿状态和10%血清浓度下细胞对细胞因子的反应,结果发现无论在血清饥饿或血清培养状态,细胞因子IL-6、IFNα和IFNβ都能刺激STAT3和STAT5磷酸化。 7.我们检测了新颖的JAK/STAT3抑制剂WP1066对骨髓瘤细胞株MM.1S、ARP-1和U266的增殖抑制作用。使用WP1066浓度0.5-10μM,作用细胞24、48和72小时,MTS检测增殖抑制作用。结果发现细胞株ARP-1的IC50是24小时为3.25μM；48小时为2.74μM,72小时为1.67μM,细胞株MM.1S的IC50是24小时为3.77μM,48小时为3.20μM,72小时为2.32μM,细胞株U266的IC50是24小时为8.81μM,48小时为4.61gM,72小时为2.15μM。同时我们也检测了WP1066对骨髓瘤原代CD138+细胞的增殖抑制作用,CDl38-细胞作为对照,WP1066对骨髓瘤原代CD138+细胞有明显增殖抑制作用,24小时IC50为5.674μM,而CD138-细胞的24小时IC50大于10μM。 8. JAK/STAT3抑制剂WPl066诱导骨髓瘤细胞凋亡,凋亡相关基因caspase3和PARP裂解。我们使用WPl0661、2和5μM作用骨髓瘤细胞株MM.1S、ARP-1和U266细胞24小时,AnnexinⅤ/PI检测细胞凋亡,并使用MSD和western blot检测裂解的caspase3和PARP,结果发现WPl066诱导细胞凋亡呈浓度依赖,而且在细胞凋亡过程中,凋亡相关基因caspase3和PARP发生裂解。 点击此处 9. JAK/STAT3抑制剂AG490、CABE和WPl066抑制IL-6诱导的STAT3磷酸化,呈浓度和时间依赖。我们使用AG490浓度50、100和300μM, CABE浓度50和100μM和WPl066浓度2.5、5和10μM作用MM细胞株MM.1S和ARP-1细胞5小时,IL-6作用细胞30分钟,MSD和western blot检测磷酸化的STAT3蛋白,结果发现AG490、CABE和WPl066抑制IL-6诱导的STAT3磷酸化,呈浓度依赖,其明显作用浓度分别AG490为300μM, CABE为100μM和WP1066 5-10μM,而且我们还研究了药物作用的时间梯度,我们分别使用300μM AG490, 100μM CABE和5μM WP1066作用细胞1、4和6小时,检测磷酸化的STAT3蛋白,我们发现药物对STAT3蛋白磷酸化的抑制作用同样呈时间依赖,最大作用时间为6小时。 10. JAK/STAT3抑制剂AG490、CABE和WPl066抑制IFNα诱导的STAT3磷酸化。我们使用AG490和CABE浓度50、100和300μM, WP1066浓度2.

The largest number of TUNEL-positive cells was observed at 24 h post-SCI. Intrathecal injection of the IL-1 receptor antagonist IL- 1Ra significantly reduced expression of p38 MAPK and caspase-3, and reduced the number of TUNEL-positive cells. Moreover, intrathecal injection of an inhibitor of p38 MAPK, SB203580, also significantly reduced the expression of caspase-3,

and reduced the number of TUNEL-positive cells in the injured spinal cord. 很少 Conclusion: The p38MAPK signaling pathway plays an important role in IL-1β mediated induction of neuron apoptosis following SCI in rats.
缺血缺氧性预适应普遍存在于机体的各器官,其机制尚未阐明。丝裂素活化蛋白激酶家族(mitogen activated protein kinases,MAPKs)是将胞外刺激信号转导至胞核介导细胞产生反应的细胞信息传递的共同通路之一,其在缺血缺氧预适应中的作用及机制成为人们关注的焦点。
丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号传导通路在炎性反应性疾病病理生理过程中调控作用的研究是近10年的新进展。其中p38MAPK信号传导通路在呼吸道粘膜炎性反应中的意义较为重要,本文就其参与炎症反应的机制以及对上皮细胞、炎性细胞和糖皮质激素受体(CR)的调控作用进行综述。
目的探讨中药脑溢安颗粒(简称脑溢安)对神经干细胞缺氧损伤的影响及其保护作用机制。方法体外培养神经干细胞来自新生3~5dSD大鼠海马组织,造缺氧损伤模型,用原位末端标记法(TUNEL)进行细胞凋亡检测,应用免疫共沉淀、激酶反应及Westernblot技术研究脑溢安对缺氧损伤神经干细胞内p38丝裂原活化蛋白激酶(p38Mitogen-activatedproteinkinase,p38MAPK)活性的影响。结果培养神经干细胞缺氧损伤后发生凋亡,脑溢安能促进缺氧损伤神经干细胞存活及减少神经干细胞凋亡;缺氧损伤后神经干细胞内p38MAPK活性增强,脑溢安血清组p38MAPK活性显著低于模型组和正常血清组(P<0.01)。结论脑溢安能保护缺氧损伤神经干细胞,抑制缺氧损伤激活的p38MAPK信号转导通路可能为其保护作用机制之一。
目的探讨p38有丝分裂素激活蛋白激酶(MAPK)对高糖诱导的人腹膜间皮细胞(HPMC)p27kip1的表达和纤连蛋白(FN)分泌的影响。方法同步化生长融合的HPMC在有或无p38MAPK抑制剂SB203580的条件下和不同浓度的葡萄糖共同孵育。采用Bradford法测定细胞内总蛋白量。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测p27kip1mRNA的表达。p27kip1和p38MAPK蛋白用Western印迹法测定。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定细胞培养液FN水平。结果高糖刺激HPMC时细胞内总蛋白量、p27kip1蛋白及细胞培养液里的FN蛋白水平明显升高。抑制p38MAPK活性可有效阻断高糖介导的腹膜间皮细胞p27kip1的表达及FN的分泌。结论高糖通过p38MAPK的活化可上调HPMCp27kip1的表达和FN的分泌。
目的探讨丝裂素激活蛋白激酶(MAPK)信号通路对血小板源生长因子(PDGF)诱导肾小管上皮细胞表型转化的作用及其对细胞移行能力的影响。方法以PDGF(20ng/ml)刺激培养的人近端肾小管上皮HK-2细胞,分别观察细胞形态、增殖和移行能力的变化。采用蛋白免疫印记法检测MAPK各亚类活性及α-平滑肌肌动蛋白(SMA)的表达,同时观察分别采用细胞外信号调节激酶(ERK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)和p38信号通路特异阻断剂PD98059、SP600125和SB203580后上述指标的变化。结果PDGF刺激6～12h使α-SMA表达上调近2倍,但刺激24～48h反而使α-SMA表达低于基础水平。PDGF刺激24h后HK-2细胞从立方形转变为梭形,细胞虽尚无增殖反应但移行能力增强至3倍(P<0.01)。PDGF诱导的ERK、JNK和p38活性均在2min时迅速增高,分别在2～5min达高峰,分别为基础水平的5.7倍、2.6倍和1.6倍(P<0.05),ERK和JNK活性增高可持续至120min,而p38活性则于60min以后恢复至基础水平。在PDGF刺激24h的情况下,PD98059和SP600125不影响基础状态及PDGF对α-SMA表达的作用,但SP600125可抑制PDGF上调的细胞移行能力(P<0.01);而SB203580既可抑制α-SMA的基础表达(P<0.01)及PDGF下调的α-SMA表达(P<0.001),同时还可显著抑制PDGF诱导的细胞移行能力(P<0.05)。结论PDGF可刺?
AIM:

所以 www.selleck.cn/products/Adrucil(Fluorouracil).html To investigate the roles of p38 mitogen-activated protein kinase (p38 MAPK) in the cardiovascular and behavioral responses induced by intracerebral ventricular injection (icv) of interleukin-1β (IL-1β) or footshock. METHODS: We examined the effects of p38 MAPK on mean artery blood pressure (mABP), heart rate (HR), and motor activity (MA) during central administration of IL-1β, or footshock after icv SB203580 (a specific inhibitor of the p38 MAPK) with Cardiovascular and Behavior Telemetry System in conscious SD rats. RESULTS: (1) IL-1β (icv) or footshock remarkably rise the mABP, and the maximal changes are (7.8±1.8) and (12.3±3.