结果:A549和H446细胞均能形成3种类型的克隆:大克隆(多于100个细胞),中克隆(50-100个细胞)和小克隆(少于50个细胞)。克隆细胞传代后,来源于小克隆的细胞不能形成新的克隆,在第2代就凋亡;来源于中克隆的细胞在第2代主要形成小克隆,只形成数量很少的中克隆,在第4代均凋亡;而来源于大克隆的细胞总是形成3种类型的克隆,即使是第10代因为。 45%以上的细胞能够形成大克隆,大克隆传代后又能形成新的克隆;来源于1个大克隆的细胞种植到BALB/C裸鼠身上,10天左右就能形成肉眼可见的肿瘤。 磁分选后CD133~+细胞和CD133~-细胞克隆形成能力及致瘤能力相同;台盼兰染色显示Hoechst33342染色能够明显影响细胞活性,种96孔板后细胞的克隆形成能selleck screening library力和增殖能力明显降低(p＜0.05)。 细胞周期显示,A549细胞系中G_1、G_2和S期细胞分别占43.39%、13.65%和42.96%;H446细胞系中G1、G2和S期细胞分别占62.75%、13.29%和23.96%。A549中能形成大克隆的单个细胞扩增至10~6需要的时间19～26天,H446中能形成大克隆或者的单个细胞扩增至10~6需要的时间17～25天,增长至10~6后增殖曲线显示,细胞增长速度基本相同。 结论:45%以上的A549细胞和H446细胞能够形成大的克隆,该克隆能够自我更新,并且不断增殖,具有致瘤能力。实验结果表明:45%以上的A549细胞和H446细胞是肿瘤始发细胞。
【目的】:探讨Sonic Hedgehog信号转导通路中的PTCH与胃癌的发生及其分化程度,侵袭,临床分期的关系。