7)处于正常状态下不具有毒性,不影响其生长。但是当细胞接受脂多糖(Lipopolysaccharide, LPS)外来刺激发挥功能时,PEG@-AuNPs能够影响其功能分泌过多的一氧化氮(NO)而具有潜在危险性。通过实验进一步证明,PEG@-AuNPs能够使LPS诱导产生更多的诱导性NO合成酶(iNOS),而这种效应部分依赖于p38的磷酸化,不依赖于ERK的磷酸化。同时我们发现RAW264.7细胞主要通过内吞的方式摄入PEG@-AuNPs,而且在LPS刺激下RAW264.7细胞能够加快对金纳米颗粒的摄入,摄入量在24h内达到平衡。综上所述,本文通过实验验证了生物相容性很好纳米材料在细胞接受刺激状态下,能够影响细胞对刺激的应答进而产生潜在的危险。这些结果能够帮助更全面的评价纳米材料的安全性,从而为纳米材料的应用提供更坚实的基础。
目的
骨骼肌组织的生长环境极其复杂,不仅受到不同方式的力的作用,还受神经及各种细胞因子的影响。通过细胞及分子水平的相关研究,将有助于阐明力学因素调控成肌细胞分化的重要信号通路,并有望从不同信号通路之间的交叉对话(Cross-Talk)角度揭示力学信号通路的激活机制。本研究的目的即是探讨青春期大鼠翼外肌组织在受到张应力刺激时其生长(改建)在细胞水平上的体现,从而为功能矫形治疗和矫治效果的保持提供新思路和实验依据,具有深远的科学意义和潜在的应用前景。这是目前国际上尚未得出确切结论的新领域。此外,针对力学环境下骨骼肌成肌细胞机能表达的深入了解和研究,可以为力学刺激治疗肌肉萎缩症提供理论依据,亦能为骨骼肌损伤后治疗及康复提供科学建议。 也许 方法 本实验选用20只4周龄,雄性SD大鼠随机分为8组。其中实验组大鼠经戊巴比妥麻醉后佩戴可摘式上颌斜面导板,对照组未佩用。依据时间不同又分为四组:1d,7d,14d,21d。1.采用RT-PCR技术分析前伸青春期大鼠下颌后翼外肌组织中肌分化相关基因MyoD、myogenin mRNA的表达变化。2.通过western-blotting检测SD大鼠翼外肌组织核蛋白中p65的表达情况。
免疫荧光染色法分别检测佩戴矫治器1h和24h后,核因子κB (NF-κB, nuclear factor kappaB)的主要亚基p65是否转运到细胞核内从而确认NF-κB信号转导通路是否被激活。 结果 1.未施加功能矫形力的大鼠翼外肌组织中MyoD表达伴随其生长发育出现递减趋势,而myogenin在14d组出现表达上调。实验组大鼠,在施加功能矫形力后,MyoD在7d组的表达明显上调。同时,力学刺激后实验组动物翼外肌中myogenin的表达与相同应力作用下的对照组大鼠比较出现上调。 以及 2.免疫荧光染色检测结果显示在施加功能矫形力组的大鼠翼外肌组织内其NF-κB p65的被激活状况较未施加功能矫形力组明显升高。提示NF-κB的主要亚基p65转移到细胞核内,据此判断NF-κB已被激活。 3. Western印迹显示在实验组大鼠的翼外肌组织核蛋白中p65随张应力作用时间延长出现表达下调,而在对照组大鼠的翼外肌组织内p65的表达无明显变化。 结论 1.功能矫形力作用于翼外肌组织可以诱导肌发生相关基因MyoD和myogenin的表达上调从而诱导成肌细胞的分化。 2.翼外肌组织在应力刺激作用下可诱导其成肌细胞中NF-κB的核转运从而调控靶基因的转录过程。 3. NF-κB信号转导通路p65的活化可能参与抑制成肌细胞的分化过程。
目的:越来越多的研究表明,骨髓间充质干细胞(Bone mesenchymal stem cells,MSCs)在体内有强大的迁移力和肿瘤趋向性。但转染外源基因的骨髓间充质干细胞在体内迁移力和肿瘤趋向性鲜有报道。胞嘧啶脱氨酶(Cytosine
一般 deamimase,CD)基因是近年被广泛关注的肿瘤治疗基因。本实验构建SD大鼠颅内C6胶质瘤动物模型,通过荧光显微镜观察转导胞嘧啶脱氨酶基因并携带有增强型绿色荧光蛋白的骨髓间充质干细胞(MSCs-CD/eGFP)向胶质瘤迁移、分布的情况,探讨通过荷瘤同侧颈内动脉、肿瘤对侧脑内及肿瘤原位三种不同接种途径MSCs-CD/eGFP细胞对胶质瘤趋向性的影响,并探索一种理想的适合临床应用接种途径。 方法:使用颅内立体定向接种法建立SD大鼠颅内C6胶质瘤模型。术前12小时大鼠禁食禁水,用10 %水合氯醛(3 ml/kg)腹腔注射麻醉大鼠后,头部用立体定位仪固定,剪去头顶毛发,碘酒、酒精消毒后铺洞巾,沿正中矢状线纵向切开头皮约1.5 cm ,分离暴露顶骨(头顶双侧眼裂连线后大约1.5cm处横向切开头皮,暴露前囟颅骨标志),按大囟中点前1.0 mm ,矢状缝右旁开3~3.5 mm ,大致定位,颅骨钻钻孔,孔径2.0 mm ,深达硬脑膜。微量注射器进针深度为硬膜下6.0 mm,后退回针1.0mm。按每只鼠1×106细胞悬液15μl于10 min内注入靶区,留针5 min ,使细胞充分沉积。缓慢拔针后用骨蜡封闭骨孔,用生理盐水冲洗术野,1号丝线缝合头皮切口。建模后的第6天,从24只大鼠中随机抽取8只,用10 %水合氯醛(3 ml/kg)腹腔注射麻醉大鼠后,分别从矢状位、冠状位和水平位行MRI扫描,平扫完毕后大鼠经尾静脉注射0.