632456vs.3.425000±0.636396；P<0.05),高压氧预处理组大鼠缺血脑组织IL-1β、TNF-α的含量明显低于模型组(P<0.05)。结论：高压氧预处理可能通过抑制NF-kB的活化使下游炎症介质靶基因表达下降进而抑制大鼠脑缺血后炎症反应,发挥神经保护作用。
衰老是正常细胞经过有限次数分裂,细胞形态和生理代谢发生显著变化的现象。衰老的人成纤维细胞核中有多个呈点状聚集的异染色质结构,这样的现象叫做衰老相关异染色质凝集(SAHF),SAHF的发现拓宽了人们对细胞衰老的认识,是研究细胞衰老的一个新的生物学标志。肿瘤发生过程中,细胞逃逸衰老和凋亡,获得无限增殖能力。通过诱导肿瘤细胞重新获得衰老特征是抑制肿瘤无限增殖的重要途径,对于我们进一步认识细胞衰老的分子机制有重要意义。我们的前期工作发现,化疗药物阿霉素(Dox)和喜树碱(SN-38)能够诱导肿瘤细胞衰老及形成SAHF,RB信号通路在药物诱导肿瘤细胞SAHF形成过程中是必须的。p16蛋白参与RB信号通路的调节,然而p16缺失的MDA-MB-231细胞也能形成SAHF,因此,我们推测有其他信号可以触发RB信号通路参与SAHF的形成。p38MAPK信号通路是细胞内众多信号通路的中转站,在肿瘤的发生、转移、凋亡中有重要作用。有研究表明,p38MAPK信号通路在细胞衰老中发挥作用。但是,关于p38MAPK信号通路在化疗药物诱导肿瘤细胞SAHF形成中是否发挥作用还不清楚。我们的研究发现,p38MAPK信号通路参与化疗药物诱导肿瘤细胞SAHF的形成。有报道,HBP1是p38MAPK信号通路下游与衰老相关的重要蛋白质。通过实验我们发现,HBP1在药物诱导的肿瘤细胞衰老中表达上调,下调HBP1的表达或抑制p38MAPK信号通路,SAHF形成的比例明显降低。进一步研究证实,HBP1通过与RB结合影响RB对E2F靶基因的调控,介导化疗药物诱导的肿瘤细胞衰老。本研究对于进一步了解化疗药物抗肿瘤的作用及对细胞衰老相关SAHF形成的机制具有重要的理论意义。
目的

C59数据表 用高糖刺激乳鼠心肌细胞模拟糖尿病诱导的心肌细胞损伤，给予吡格列酮处理观察高糖对心肌细胞炎症因子的影响，以p38MAPK通路的激化情况和NF-κB活性的影响。 方法 1.乳鼠心肌细胞的分离与培养以及实验分组 乳鼠心肌细胞原代分离培养48h后首度换液，再培养24h并进行无血清化6-8h后分成四组：1）正常对照组：使用5.5mmol/L的葡萄糖DMEM培养基作为对照组进行培养；2）高糖组：使用30mmol/L的葡萄糖DMEM培养基作为高糖组进行培养；3）低剂量组：使用30mmol/L的葡萄糖的DMEM培养基加入终浓度10μmol/L的吡格列酮为低剂量组进行培养；4）高剂量组：使30mmol/L的葡萄糖的DMEM培养基加入终浓度20μmol/L的吡格列酮为高剂量组进行培养，各组细胞均继续培养48h后收集细胞及培养基上清进行指标测定。 A-1210477分子量 2.指标检测 LDH试剂盒测定培养基中LDH的含量，反应心肌细胞受损程度，ELISA法测定培养基上清中的炎症因子IL-6、TNF-α的含量变化，反应心肌细胞中炎症因子产生的情况，用细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒提取胞核蛋白，Western

Blot法测定细胞胞核转录因子NF-κB亚基p65的蛋白表达情况，另将收集的细胞提取总蛋白同样用Western Blot法检测p-p38MAPK的蛋白表达情况。 结果 1.乳酸脱氢酶（LDH）含量的测定 结果显示，高糖组细胞培养液中LDH的含量显著上升（p<0.01），说明高糖对心肌细胞产生了损伤作用。细胞给予吡格列酮处理后培养液中LDH的含量显著的下降（p<0.05；p<0.01），提示高糖可引起心肌细胞炎症性损伤；而给予吡格列酮处理后（低剂量组与高剂量组），心肌细胞的炎症因子IL-6含量明显下降（p<0.05），TNF-α的含量也显著减少（p<0.01），而经吡格列酮处理后（低剂量组与高剂量组）p-p38MAPK蛋白表达升高明显得以改善（p<0.05；p
目的：采用自发性糖尿病肾病(Diabetic 所以 kidney disease, DKD) KKAy小鼠,对照药物为厄贝沙坦,观察糖肾平对DKD KKAy小鼠药效学和氧化应激水平的影响,并采用免疫组化、原位杂交和Western blotting方法观察糖肾平对DKD KKAy小鼠肾组织中Smad6、转化生长因子-β1 (Transforming growth factor-β1, TGF-β1)、BMP7、α-SMA、E-Cadherin蛋白及mRN A表达的影响。方法：1.糖肾平对DKD KKAy小鼠药效学的影响10只雌性C57BL/6J小鼠作为正常对照组。雌性10周龄KKAy小鼠60只,KK鼠配合饲料诱导10周后,血糖≥16.7mmol/L 24h尿蛋白≥0.4mg为糖尿病肾病动物模型。模型小鼠按血糖和体质量分层随机,分为模型组、厄贝沙坦组与糖肾平小、中、大剂量组,并进行相应药物的灌胃治疗。观察小鼠一般情况,检测体质量、24h尿蛋白定量。实验第26周,眼球取血,全血测血糖,分离血清,检测甘油三酯(Triglyeride, TG)、尿素氮(Blood urea nitrogen, BUN)、肌酐(Serum creatinine,

Scr)含量；称取小鼠肾重,计算肾重体重比；肾组织石蜡切片行HE、Mallory染色观察肾组织病理形态变化。2.比色法生化仪检测血清中丙二醛(Malondialdehyde, MDA)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase, SOD)和一氧化氮(Nitric oxide, NO)水平。3.免疫组化：检测小鼠肾组织中TGF-β1、Smad6、BMP7、α-SMA、E-Cadherin蛋白表达。4.原位杂交：检测小鼠肾组织中TGF-β1、Smad6、BMP7、α-SMA、E-Cadherin mRNA表达。5. Western blotting:检测小鼠肾组织中TGF-β1、Smad6、BMP7、α-SMA、E-Cadherin蛋白表达。6.实验数据用SPSS20.0软件进行统计学处理。结果：1.糖肾平对DKD KKAy小鼠药效学的影响与模型组比较,糖肾平小、中、大剂量组小鼠一般状态改善、体质量均有不同程度减轻,治疗16周后糖肾平中、大剂量组小鼠体质量明显减轻(P<0.01),肾质量与体质量比值显著降低(P<0.01),24h尿蛋白定量显著减少(P<0.01),血清BUN含量显著降低(P<0.01),MDA含量显著降低(P<0.01)；且糖肾平大剂量组降低最明显。正常对照组肾小管上皮细胞胞浆Smad6、BMP7、E-Cadherin蛋白强阳性表达,明显高于模型组(P<0.01)；与模型组比较,各治疗组肾小管上皮细胞胞浆Smad6、BMP7蛋白表达明显增多,有显著统计学差异(P<0.01),糖肾平大剂量组肾小管上皮细胞胞浆E-Cadherin蛋白表达明显增多,有显著统计学差异(P<0.01),糖肾平小、中剂量组肾小管上皮细胞胞浆E-Cadherin蛋白表达增加,有统计学差异(P<0.