316±0.069)；NS组平均胶原面积比是(0.317±0.073)；LK组平均胶原面积比是(0.63±0.102)；HK组平均胶原面积比是(0.737±0.066).LK组平均胶原面积比,较NS组显著增多(平均差±标准误：0.321±0.050,P=0.0001,P0.05). 6.大鼠膀胱组织免疫组化 各组大鼠膀胱免疫组化显示E-cadherin (E-钙粘蛋白)主要表达于膀胱粘膜上皮层,其他固有层、粘膜下疏松结缔组织层、平滑肌层未见明显表达,血管内皮可见少量表达。对大鼠膀胱粘膜层E-cadherin的表达强度进行量化分析。E-cadherin的平均光密度值,NS组为(0.3656±.0678)；LK组为(0.4380±0.0456)；HK组为(0.5668±0.1972).HK组和NS组的平均光密度值比较,无显著性差异(平均差±标准误：0.2013±0.0933,P=0.204,P>0.05)；LK组和NS组比较,平均光密度值无统计学差异(平均差±标准误：0.0724±0.0365,P=0.221,P>0.05)；HK组和LK组比较也无统计学差异0.1289±0.0905,P=0.475,P>0.05).NS.
Selleck PLX4032 LK, HK三组间比较无统计学意义(F=3.422,P=0.067,P>0.05) 7.大鼠肾脏HE染色结果 NS组大鼠的肾脏结构形态均正常,无水肿变形,无淤血或管型。HK组和LK组：肾间质和肾小球周围可见大量炎症细胞浸润；大量肾小管水肿,广泛中重度空泡样改变,多处小灶状小管坏死；肾小球空化,肾小球萎缩,甚至肾小球闭锁,肾小球壁层上皮增生；肾间质有纤维条索形成。 8.大鼠肾脏马松染色结果 LK组和HK组比较NS组可见肾间质胶原染色深,提示经过氯胺酮长期作用,肾间质发生胶原沉积增加导致纤维化。HK组肾脏间质纤维染色深且可见纤维化条索形成。半定量分析肾间质平均胶原面积比结果显示,三组间比较存在显著性差异(F=29.293,P=0.00010.05),提示LK组(低剂量)肾间质胶原沉积和正常肾间质无明显区别。
9.大鼠肾脏Tunel凋亡检测结果 在肾小球部分。肾小球凋亡细胞数的半定量结果,HK组肾小球平均阳性细胞数是(30.9200±3.21123)；LK组是(40.1600±8.64916)；NS组是(16.6400±4.27411),三组间相互比较具有统计学差异(F=20.372,P=0.00010.05); LK组和NS组比较,具有显著性差异(平均差±标准误：23.52000±4.31453, P=0.0050.05)：HK组和LK组比较,无明显差异(平均差±标准误：-72.40000±26.63857, P=0.056>0.05); LK组和NS组比较,具有显著性差异(平均差±标准误：129.60000±26.63857, P=0.0010.05); LK组和NS组比较,有统计学差异(平均差±标准误：123.40000±39.75458,P=0.027HK:9.60>NS:3.60) 扣除肾小球部分后计算每高倍镜视野下平均肾小管阳性细胞数可见,HK组和LK组肾小管阳性凋亡细胞数均多于NS组。LK组肾小管凋亡更加显著。提示长期滥用氯胺酮可诱导肾小管和肾小球细胞凋亡,似乎LK组诱导凋亡更明显。 可能 结论 通过动物实验研究结果得出,长期滥用氯胺酮的大鼠,会出现体重减轻,尿频,血尿,尿常规异常,肾功能异常,膀胱组织发生炎症和纤维化,肾脏细胞发生凋亡,肾间质纤维化等变化。根据前期课题组的实验条件及本次重复的膀胱结果显示,我们成功建立起KC大鼠模型,我们推测氯胺酮及其代谢产物在肾脏排泄时,直接作用于大鼠肾脏滤过系统,导致了肾脏组织细胞凋亡以及肾功能的变化。可能在氯胺酮滥用患者中,从一开始氯胺酮及其代谢产物就对肾小球滤过系统如足细胞、肾小管上皮细胞等产生毒理作用,导致肾小管,肾间质,肾小球等发生病变。 我们发现肾脏间质、肾小球周围等发生炎症细胞浸润,侧面反映了机体免疫系统参与肾损害的修复。推测在早期滥用氯胺酮中这种损害和修复处于动态平衡中,未被打破,因此肾功能并未出现明显变化。这与在临床上早期发生KC的病例大多数出现LUTS症状,膀胱损害明显,而只有少数患者出现肾功能损害基本一致,也就是说当出现KC时,氯胺酮及其代谢产物对肾脏的毒理作用也是正在进行中。至于为什么上尿路发生损害表现较滞后,这可能与氯胺酮及其代谢产物在肾脏滤过滞留时间长短有关。当严重KC患者发生肾积水或者膀胱输尿管返流时出现肾梗阻性损害则进一步加重氯胺酮的作用,最终导致肾功能不全,甚至肾衰竭。
Verteporfin 因此在临床上,我们对诊断KC的患者早期就应该树立肾脏损害的意识,并对肾脏进行保护。在患者肾功能未出现明显异常时,即应加强补液同时应用利尿剂,促进氯胺酮及其代谢产物快速排出体外,缩短它们在肾脏和整个泌尿道滞留的时间,可减少它们对泌尿系统的损害作用。在已经出现肾功能异常的患者时亦应早期行导尿,抗纤维化等治疗。当然滥用氯胺酮对患者体内多个系统都是有损害的,如肝脏,神经系统,心血管系统等,因此多学科协作、综合及个体化的治疗也是很有必要的。关于氯胺酮对泌尿系损害的机制仍需要进一步研究。
目的： ①探讨rhIL-24蛋白与顺铂联合体外对人卵巢癌SKOV3细胞、人卵巢癌耐顺铂株SKOV3/ddp细胞的抑制效应； ②探讨rhIL-24蛋白联合顺铂体外诱导人卵巢癌SKOV3细胞、人卵巢癌耐顺铂株SKOV3/ddp细胞凋亡效应、细胞周期及凋亡基因的变化； ③探讨腺病毒介导的白细胞介素-24基因与顺铂联合体外诱导人卵巢癌SKOV3细胞的抑制效应及细胞凋亡情况变化。 方法： ①用rhIL-24、DDP及rhIL-24+DDP作用于SKOV3细胞、SKOV3/ddp细胞，用Ad-hIL-24、DDP及Ad-hIL-24+DDP作用于SKOV3细胞抑制细胞生长； ②应用CCK-8法检测SKOV3细胞、SKOV3/ddp细胞增殖情况，计算抑制率； ③应用流式细胞仪检测SKOV3细胞、SKOV3/ddp细胞凋亡及细胞周期的变化； ④应用多基因遗传表达分析SKOV3细胞、SKOV3/ddp细胞凋亡多基因的变化。 结果： ①SKOV3细胞、SKOV3/ddp细胞在适宜条件下培养于第3天进入对数生长期； ②rhIL-24蛋白能抑制SKOV3细胞、SKOV3/ddp细胞生长，48小时的抑制率分别为30.7%、21.8%，对正常细胞无毒性作用；联合DDP组抑制率分别为35.3%、32.