7炎症细胞模型，检测了银杏叶多糖(PGBL)对炎症细胞的增殖活性、前炎症细胞因子及相关基因表达的影响；并通过检测PGBL对炎症细胞内核转录因子-κB的作用，探讨了PGBL在NF-κB炎性信号通路的作用，为PGBL的抗炎药物研发及临床应用提供理论与实验依据。 可能 方法：建立LPS诱导的RAW264.7炎症细胞模型，利用MTT法检测PGBL对炎症细胞RAW264.7增殖活性；双夹心ELISA法测定前炎症细胞因子TNF-α的表达；RT-PCR法测定前炎症细胞因子基因TNF-α、IL-6的mRNA表达；Westernblot法测定核NF-κB在细胞内的表达。 结果：成功建立了RAW264.7炎症细胞模型；在特定浓度范围内，PGBL可显著抑制炎症细胞RAW264.7的增殖能力，且对RAW264.7细胞无毒性作用；PGBL可抑制炎症细胞RAW264.7的TNF-α的表达，且抑制率与PGBL浓度呈正相关；PGBL对炎症细胞RAW264.7的TNF-α和IL-6mRNA的表达有抑制作用，且抑制率与PGBL浓度呈正相关；PGBL对炎症细胞RAW264.7的NF-κB表达有抑制作用。 结论：PGBL可以抑制炎症细胞RAW264.7的增殖，且对正常RAW264.7未表现出毒性作用。PGBL可通过调节炎性信号转导通路中NF-κB的表达，抑制TNF-α和IL-6基因的表达发挥抗炎活性。
目的
研究黄芩苷对高糖环境下肾小球系膜细胞(GMC)增殖的抑制作用及NF-κB表达的影响,充实DN肾脏复杂的细胞因子网络理论,揭示黄芩苷防治DN的药效机制,为中医药防治DN提供实验依据。 PI3K抑制剂 方法 本实验将体外培养的大鼠肾小球系膜细胞(GMC)分为六组：(1)低糖组(LG5.5mmol/L),(2)高糖组(HG25mmol/L),(3)黄芩苷低剂量组(HG+黄芩苷25μmol/L),(4)黄芩苷中剂量组(HG+黄芩苷50μmol/L),(5)黄芩苷高剂量组(HG+黄芩苷100μmol/L),(6)氯沙坦组(HG+氯沙坦钾10μmol/L)。每组设平行6孔,培养24h、48h、72h。实验结束时应用MTT比色法检测各组GMC生长情况。根据MTT法检测结果,选择最佳作用时间点,采用免疫组化法检测FN蛋白表达情况。收集细胞并提取核蛋白,应用Western
blot方法检测各组NF-κB表达情况。 结果 (1)高糖组在24h、48h、72h时间段的吸光值均较低糖组增高,且随培养时间延长而增高明显(P<0.05)；黄芩苷低剂量组、黄芩苷中剂量组、黄芩苷高剂量组、氯沙坦组在24h时间段吸光值均较高糖组高,48h、72h时间段较高糖组低(P黄芩苷中剂量组>黄芩苷高剂量组。氯沙坦组NF-κB表达量与高糖组比较未见明显差异。 结论 高糖环境下体外培养的GMC存在异常增殖现象,黄芩苷能抑制高糖诱导的GMC异常增殖,且呈时间、剂量依赖关系,其机制可能与黄芩苷下调NF-κB表达有关。
目的： 环维黄杨星D (Cyclovirobuxinum D, Cvb-D)为黄杨科植物小叶黄杨及其同属植物中提取精制所得生物碱,可行气活血,通络止痛,对与心肌肥厚发生发展密切相关的因子都有明显调节作用,但对心肌肥厚疗效尚未见报道。本研究利用异丙肾上腺素(ISO)诱导小鼠心肌肥厚、左旋甲状腺素(L-thy)诱导大鼠心肌肥厚两个模型,从组织病理形态学、神经体液因子、心肌能量代谢以及相关信号通路探讨Cvb-D对心肌肥厚的药效及其作用机制,为其临床应用提供实验依据,拓展中医药防治心血管疾病的新领域。
PLX4032半抑制浓度 方法： 取KM小鼠皮下注射ISO1.0mg/kg,每d两次,连续14d,制备小鼠心肌肥厚模型,给予低、中、高剂量环维黄杨星D(6.0、9.0、12.0mg/kg·d),灌胃给药14d。以小鼠心脏重量指数(HW=全心重量/体重)、左心室重量指数(LIWI=左心室重量/体重)、病理形态学(HE染色)、心肌能量代谢变化(游离脂肪酸FFA、乳酸LD)和凋亡调控基因bax、bcl-2蛋白阳性表达量(免疫组织化学)为指标考察Cvb-D对小鼠心肌肥厚的保护作用。 取SD大鼠腹腔注射L-thy1.0mg/kg-d,连续14d,制备大鼠心肌肥厚模型,给予低、中、高剂量环维黄杨星D(6.0、12.0、24.0mg/kg·d),灌胃给药14d。以大鼠心脏重量指数、左心室重量指数、病理形态学、心肌NO系统(NO、NOS)、抗氧化损伤(SOD、MDA含量)为指标考察Cvb-D对大鼠心肌肥厚的疗效。以凋亡调控基因bax、bcl-2蛋白阳性表达量、原癌基因c-fos、c-jun mRNA和丝裂原活化蛋白激酶MAPK通路中p38a, p381βmRNA的表达变化(实时荧光相对定量RT-PCR)为指标,初步探讨Cvb-D对大鼠心肌肥厚的保护作用机理。 结果： 1环维黄杨星D (Cvb-D)对心肌肥厚的药效研究 与模型对照组比较,Cvb-D高剂量组小鼠心脏重量指数(HW)和左心室重量指数(LHWI)明显降低(P<0.01或P<0.05)；Cvb-D低、中、高剂量组大鼠心脏重量指数(HW)和左心室重量指数(LHWI)明显降低(P<0.01或P<0.05)：Cvb-D中、高剂量组大鼠和小鼠心肌细胞肥厚扩大、细胞间隙紊乱现象有明显的改善；Cvb-D低、中、高剂量组小鼠血清游离脂肪酸(FFA)和乳酸(LD)含量显著下降(P<0.01,或P<0.05);Cvb-D中、高剂量组大鼠心肌组织SOD活性显著升高；Cvb-D低、中、高剂量组大鼠心肌组织MDA含量明显降低(P<0.05)；Cvb-D低、中、高剂量组大鼠心肌组织NO含量显著上升(P<0.01或P<0.05)；Cvb-D中、高剂量组大鼠心肌组织NOS的含量显著升高(P<0.01或P<0.05或P<0.05或P<0.