为构建Slfn2~(-/-)小鼠肺癌细胞系(Lewis lung carcino抑制剂ma， LLC），本文利用CRISPR/Cas9技术，在CHOPCHOP网站筛选Slfn2基因的sgRNA序列，将合成的oligo序列退火后连接至pLenti CRISPR v2质粒中，并与pMD2.G、psPAX2共转染至293T细胞中包装慢病毒；利用包装的慢病毒感染LLC细胞，经筛选和单克隆培养，获取Slfn2~(-/-)敲除的LLC细胞。结果显示：SgRNA成功临床试验插入载体重组质粒；利用3质粒包装的慢病毒成功将LLC中的Slfn2基因突变，获得丢失8个碱基的移码突变和丢失180个碱基的缺失突变的Slfn2~(-/-)小鼠肺癌细胞。可见，利用CRISP点击此处R/Cas9技术成功构建了slfn2基因敲出的小鼠肺癌细胞。