“肾虚湿热”是中医对慢性肾脏病病因病机的总概括,细胞自噬异常或可看作肾虚湿热病机的微观体现。临床利用”益肾清利”法治疗慢性肾脏病具有良好的疗效,益肾清利中药具有减轻细胞损伤、改善蛋白尿、延缓肾脏纤维化等作用。现有研究存在如下问题(1)起效机制研究主要集中于mTOR相关信号通路,缺乏对非mTOR信号通路的研究;(2)益肾清利中药对自噬水平的调控是否具有双向性,这一BLZ945化学结构特性是否与药物剂量或单一中药的不同成分相关,尚未明确;(3)中药复方作用靶点研究难度较大,机制研究尚不充分。今后需进一步明确益肾清利法治疗慢性肾脏病的起效机制,加强对中药干预细胞自噬过程具体环节的研究,进一步探讨其是否具有双向调节作用,同时加强中药复方各有效成分发挥协同拮抗作用的现代药理学证据支持。
目的 研究人视网膜色素上皮(R可能PE)细胞光损伤中自噬与凋亡之间的关系, 并探讨自噬抑制剂3甲基腺嘌呤(3MA)对光诱导下RPE细胞自噬和凋亡的影响。方法 实验研究。将体外培养的人RPE细胞(ARPE-19)随机分为12 h对照组、12 h模型组、12 h 3MA组以及24 h对照组、24 h模型组、24 h 3MA组。对照组采用锡纸包裹避光培养;模型组接受光照刺激;IWR-1-endo化学结构3MA组中加入3 mmol/ml 3MA后接受光照刺激, 以自制三基色LED(发光二极管)冷光灯作为光源, 在(16 500±500)lx光照强度下照射细胞12 h和24 h。透射电子显微镜观察每组细胞超微结构, 流式细胞仪测定细胞存活率, 激光共聚焦结合倒置荧光显微镜定性、定量分析自噬-溶酶体形态及荧光强度, Western blot法检测Beclin 1、LC3和P62自噬相关蛋白表达量。数据采用单因素方差分析。