其中内质网应激的标志性蛋白——GRP78表达上调。3.Western blot结果显示,与对照组相比,SiO_2刺激3 h后,GRP78蛋白水平显著增加(P<0.01)。CHOP和Caspase-12蛋白水平在SiO_2刺激6 h至48h之内持续增加,具有时间依赖性(P<0.01)。第二部分Ac-SDKP对内质网应激的调节在抑制二氧化硅诱导的人肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡中的Kinase inhibitor Library ����作用及其机制目的以人肺泡Ⅱ型上皮细胞株A549为研究对象,观察Ac-SDKP对SiO_2诱导的人肺泡Ⅱ型上皮细胞内质网应激的调节作用,探讨Ac-SDKP抑制SiO_2诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡的作用机理。方法1将人肺泡Ⅱ型上皮细胞株A549分为1)对照组;2)SiO_2(50μg/cm~2)刺激组;3)4-PBA(0.5mmol/L)处理组4获悉更多)Ac-SDKP(10~(-8)mol/L)处理组。2采用透射电镜观察Ac-SDKP及4-PBA对SiO_2刺激的A549细胞超微结构的影响。3采用流式细胞仪Annexin V-FITC/PI染色法检测Ac-SDKP及4-PBA对SiO_2刺激的A549细胞凋亡的影响。4免疫细胞化学染色法检测Ac-SDKP及4-PBA对SiO_2刺激的A54Apoptosis抑制剂9细胞GRP78、CHOP以及Caspase-12蛋白表达的调节作用。5采用Western blot法检测Ac-SDKP及4-PBA对SiO_2刺激的A549细胞GRP78、phospho-PERK、phospho-eIF2α、CHOP以及Caspase-12蛋白表达的影响。结果1.透射电镜观察可见,Ac-SDKP、4-PBA的预处理显著改善了Si O_2诱导的内质网扩张程度,无明显胞浆空泡化,核固缩以及染色质浓缩现象。