此外,牛凸隆病毒(Bovine torovirus,BToV)、牛诺如病毒(Bovine norovirus,BNoV)、牛纽布病毒(Bovine nebovirus,BNebV)、牛星状病毒(Bovine astrovirus,BoAstV)及牛嵴病毒(Bovine kobuvirus/aichivirus B,BKoV)也可购买抑制剂诱发牛腹泻。随着病原检测技术,尤其是分子检测技术的进步,许多检测方法如IEM、RT-PCR、ELISA和PAGE已用于病毒的检测和疾病诊断。本文结合国内外文献资料,对牛病毒性腹泻的病原分子生物学特征及诊断技术进行概述,以期为牛腹泻的致病原因和检测技术的进一步研究提供基础。
以羽衣甘蓝(Br寻找更多assica oleracea var. acephala)自交不亲和系(S13-bS13-b)为试材,利用RT-PCR和RACE的方法从柱头中分离类蛋白质二硫键异构酶Bo PDIL1-2基因。将Bo PDIL1-2编码区的序列构建到原核表达载体p ET-14b上,并转化到大肠杆菌中进行原核表达与纯化;查找更多用纯化后的蛋白免疫小鼠,制备Bo PDIL1-2多克隆抗体;通过免疫印迹法检测Bo PDIL1-2在不同组织及不同发育阶段柱头的表达情况。氨基酸序列比对分析结果显示,羽衣甘蓝Bo PDIL1-2与油菜Bn PDIL1-2、拟南芥At PDIL1-2的一致性分别是97. 3%和85. 5%。SDS-PAGE结果显示,在分子量58 k D处有Bo PDIL1-2蛋白特异性地诱导表达。