84%（13/147）。 2.NSCLC患者原发灶与配对淋巴结转移灶c-MET基因扩增的差异性比较 c-MET扩增阳性率配对原发灶为8.45%（6/71），配对淋巴结转移灶为18.31%（13/71）。配对的71对原发灶、转移灶组织中，原发灶扩增阳性6例，转移灶扩增阳性13例，转移灶扩增阳性而对应的原发灶扩增阴性8例，原发灶扩增阳性而对应的转移灶扩增阴性1例，淋巴结转移灶扩增阳性率高于原发灶，两组间差异有统计学意义（McNemar检验,p=0.039）。
3. NSCLC患者原发灶与配对淋巴结转移灶c-MET基因扩增的一致性比较 用淋巴结转移灶预测原发灶c-MET扩增阳性，其一致性良好（kappa=0.464, p＜0.001），通过淋巴结转移灶判断原发灶扩增情况，灵敏度为83.3%（5/6），特异度为87.7%（57/65）。原发灶和淋巴结转移灶两组间c-MET基因扩增阳性率有统计学差异，但是一致性良好，说明淋巴结转移灶c-MET扩增阳性率的升高是基于原发灶的扩增情况的，它是对原发灶扩增情况的一个放大。 4. NSCLC患者原发灶和淋巴结转移灶c-MET基因扩增与临床特征的关系 （1）147例NSCLC原发灶当中，c-MET扩增阳性率在男、女两个亚组当中分别为10.6%和7.1%（p＝0.489），在高龄（≥60岁）和非高龄（＜60岁）两个亚组当中分别为7.1%和11.3%（p＝0.372），在吸烟和不吸烟两个亚组当中分别为12.8%和3.1%（p＝0.213），在鳞癌和腺癌两个亚组当中分别为4.2%和10.1%（p＝0.362），均无统计学差异。即在NSCLC原发灶当中c-MET基因扩增与性别、年龄、吸烟史及病理类型无关。 （2）71例NSCLC配对原发灶当中，c-MET扩增阳性率在男、女两个亚组当中分别为8.6%和8.3%（p＝1.000），在高龄和非高龄两个亚组当中分别为7.3%和10.0%（p＝0.692），在吸烟和不吸烟两个亚组当中分别为12.1%和3.6%（p＝0.142），在鳞癌和腺癌两个亚组当中分别为4.0%和10.9%（p＝0.414），均无统计学差异。即在配对的71例NSCLC原发灶当中c-MET基因扩增与性别、年龄、吸烟史及病理类型无关。 哪里 那个 （3）71例NSCLC配对转移灶当中，c-MET扩增阳性率在男、女两个亚组当中分别为28.6%和8.3%（p＝0.035），在吸烟和不吸烟两个亚组当中分别为28.2%和6.3%（p＝0.029），差异均存在统计学意义。在高龄和非高龄两个亚组当中分别为17.6%和23.3%（p＝0.371），在鳞癌和腺癌两个亚组当中分别为8.0%和23.9%（p＝0.414），差异均无统计学意义。即在NSCLC配对转移灶当中c-MET扩增在男性、吸烟患者明显升高：出现N2以上淋巴结转移患者的淋巴结转移灶组织中，男性为28.6%（10/35）存在扩增，吸烟患者为28.2%（11/39）存在扩增，其中男性吸烟患者味30.4%（7/23）存在扩增。
结论 1.参与本次实验中国人群NSCLC患者的肿瘤组织原发灶中c-MET基因扩增阳性率为8.84%，较国外文献报道偏高，与国内报道的阳性率并不一致，但本次结果在国内报道阳性率的范围内，由此预测中国人群c-MET基因扩增率高于欧美人群。考虑到针对c-MET基因扩增的分子靶向药物治疗可以使近十分之一的NSCLC患者获益，故c-MET基因扩增检测应当同EGFR、EML4-ALK等共同作为NSCLC的常规基因检测项目。 2.在原发灶和淋巴结转移灶c-MET扩增阳性率并不相同，淋巴结转移灶高于原发灶。考虑到淋巴结转移灶c-MET扩增阳性率的升高是基于原发灶的扩增情况的，发生淋巴结转移能够放大原发灶扩增的情况。原发灶扩增阳性者淋巴结转移灶扩增更加明显，原发灶未发生扩增者淋巴结转移灶亦无明显扩增，原发灶只是发生轻度扩增而导致无法检出者，淋巴结转移灶会发生较明显的扩增，从而将这部分c-MET扩增患者检出。多数原发灶c-MET扩增阳性的患者，淋巴结转移灶扩增也为阳性，灵敏度和特异度均较高，一致性良好。因而，对淋巴结转移灶进行c-MET基因扩增检测能筛出更多有适应症的患者。以往的分子靶向治疗经验已证明，无论是原发灶还是转移灶出现基因突变，都可以作为相应分子靶向药物治疗的适应症。综上所述，用淋巴结转移灶进行c-MET基因扩增的检测，效果优于原发灶。 3.本次研究当中发现c-MET基因扩增在原发灶与基线资料无关，但在淋巴结转移灶男性患者高于女性患者，吸烟患者高于不吸烟患者，提示对于存在N2级以上淋巴结转移的男性吸烟患者，c-MET基因扩增检测对其有非常重要的临床诊疗价值，对于这类型的患者，如果有可能，均应对其淋巴结转移灶进行c-MET基因扩增的检测。
目的：通过检测常见的45个肿瘤基因在NSCLC中的突变状况，筛查与NSCLC相关的驱动基因，分析其常见的突变位点及突变类型，并探讨其与NSCLC的临床一般资料、病理特点、疗效及预后的相关性，为NSCLC患者的个体化治疗提供一定的理论依据。
方法： 1.收集大连医科大学附属第一医院2012年3月至2013年12月、经组织病理学证实的NSCLC患者共96例，收集并记录所有患者的临床信息，包括1）一般资料，如性别、年龄、吸烟史等；2）病理特点，如标本来源、病理类型及分化程度；3）肺癌TNM分期（根据2009年第七版IASLC新分期）；4）治疗情况，如治疗方案、疗效和生存期随访等。 2.采用Ion Torrent新型基因测序技术，检测与肿瘤相关的常见45个基因状态，筛选出样本中突变频率大于10%的相关基因，分析每个基因具体的突变信息。针对筛选出的驱动基因，进行精确度更高的Sanger测序验证。 Mdm2 pathway 抑制剂 3.采用SPSS13.0统计软件，探讨驱动基因与临床资料的相关性，应用χ2检验、Fisher确切概率法及秩和检验，进行各组间率的分析；应用Kaplan-Meier法分析生存时间，并绘制生存曲线，不同组间的生存曲线采用log-rank检验；采用Cox多因素回归模型，分析多个可能影响预后的因素；应用Spearman相关分析，探究基因之间的相关性，所得统计结果，以P10）的基因进行筛选并分析： 2.1EGFR基因突变占34.4%（33/96），其中19外显子突变率60.0%（20/33），突变类型为缺失突变；20外显子突变者率6.1%(2/33)、21外显子突变率45.5%(12/33)，二者突变类型为错义突变。 2.2KDR基因突变占24.0%（23/96），其中6外显子突变率为30.4%(7/23)，突变类型为翻译终止突变；7外显子突变率占60.9%(14/23)、11外显子突变率17.4%（4/23），二者突变均为错义突变。 2.3KRAS基因突变占10.4%（10/96），10例突变全部发生在2外显子，突变类型为错义点突变。 3.驱动基因与一般临床资料及病理特征的相关性： 3.1EGFR在女性中突变率高于男性（P=0.007）,腺癌高于鳞癌（P=0.038），不吸烟者高于吸烟者（P=0.02），中-高分化者高于低分化者（P=0.