aureus乳腺炎的感染损伤机制还不清楚,因此探索S.aureus乳腺炎发生、发展与转归的分子机制迫在眉睫。 中性粒细胞是奶牛乳腺抵御病原菌侵袭的第一道防线,它的凋亡对于控制乳腺炎症的发展和转归至关重要,在解除奶牛不良炎性反应中发挥重要作用。 为了探索奶牛S.aureus乳腺炎发生时中性粒细胞凋亡的分子机制,找到调控中性粒细胞凋亡的相关基因,本实验在体外37℃,5%C02的条件下培养从奶牛外周血中分离到的中性粒细胞,向培养基中以50：1的比例加入处于对数生长期的S.aureus,分别在共培养Oh,2h,4h,6h,8h,10h后用PITC/PI双染法通过流式细胞术检测中性粒细胞凋亡情况。最后利用基因芯片技术筛选出与中性粒细胞凋亡相关的基因,并通过qPCR对芯片结果加以验证。实验所得结果有以下几个方面：
1、中性粒细胞体外培养存活情况 体外培养的中性粒细胞的活细胞比例随着培养时间的延长不断下降,培养Oh时为100%,培养10h后活细胞比例降为80%,培养28h后降至50%。 2、S.aureus诱导中性粒细胞凋亡情况 在第Oh,2h,4h,6h,8h和10h检测中性粒细胞凋亡,实验组细胞凋亡率相比于对照组均存在极显著差异,差异值分别为3.31%,4.63%,6.77%,8.83%,8.12%和6.35%,其中诱导时间为6h时凋亡率差异最大。 3、基因芯片结果 与凋亡相关的差异表达基因共有4个,其中上调表达的为Bcl-2,它的上调表达倍数为2.4847；下调表达的有IL1-α, {Selleck Anti-infection Compound Library|Selleck Antiinfection Compound Library|Selleck Anti-infection Compound Library|Selleck Antiinfection Compound Library|selleck Anti-infection Compound Library|selleck Antiinfection Compound Library|selleck Anti-infection Compound Library|selleck Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|buy Anti-infection Compound Library|Anti-infection Compound Library半抑制浓度|Anti-infection Compound Library价格|Anti-infection Compound Library花费|Anti-infection Compound Library溶解度|Anti-infection Compound Library购买|Anti-infection Compound Library制造商|Anti-infection Compound Library查找购买|Anti-infection Compound Library订单|Anti-infection Compound Library mouse|Anti-infection Compound Library chemical structure|Anti-infection Compound Library分子量|Anti-infection Compound Library molecular weight|Anti-infection Compound Library数据表|Anti-infection Compound Library supplier|Anti-infection Compound Library体外|Anti-infection Compound Library细胞系|Anti-infection Compound Library concentration|Anti-infection Compound Library nmr|Anti-infection Compound Library体内|Anti-infection Compound Library clinical trial|Anti-infection Compound Library cell assay|Anti-infection Compound Library screening|Anti-infection Compound Library high throughput|buy Antiinfection Compound Library|Antiinfection Compound Library半抑制浓度|Antiinfection Compound Library价格|Antiinfection Compound Library花费|Antiinfection Compound Library溶解度|Antiinfection Compound Library购买|Antiinfection Compound Library制造商|Antiinfection Compound Library查找购买|Antiinfection Compound Library订单|Antiinfection Compound Library chemical structure|Antiinfection Compound Library数据表|Antiinfection Compound Library supplier|Antiinfection Compound Library体外|Antiinfection Compound Library细胞系|Antiinfection Compound Library concentration|Antiinfection Compound Library clinical trial|Antiinfection Compound Library cell assay|Antiinfection Compound Library screening|Antiinfection Compound Library high throughput|Anti-infection Compound high throughput screening| IL1-β和IL1-R1,下调表达倍数分别为0.2125,0.2062和0.3082。 4、qPCR验证结果 qPCR结果与芯片结果一致的有ILl-α, ILl-β和IL1-R1三个基因,而Bcl-2与芯片结果相左,表现为下调表达。 通过以上结果能得到如下结论： 1、中性粒细胞在体外环境下能够自发凋亡,存活时间较短； 2、S.aureus能够诱导体外培养的中性粒细胞凋亡,而且在10h的诱导时间内凋亡率的变化是极显著的； 3、调控中性粒细胞凋亡的基因主要为原癌基因Bcl-2, IL1及其受体。 4、芯片结果比较可信。
本研究通过建立亚急性镉染毒诱导小鼠模型,运用HE染色、透射电镜、免疫组化和Western blotting等技术方法,研究了雷帕霉素在抗镉诱导小鼠脑神经细胞氧化应激和凋亡中的保护作用,探讨雷帕霉素抑制镉诱导小鼠脑组织mTOR通路激活抗凋亡机理,为雷帕霉素在防止镉诱导的神经变性疾病提供理论依据和科学指导。结果如下： 1雷帕霉素抑制镉诱导小鼠脑神经细胞氧化应激发挥抗凋亡保护作用 36只成年健康ICR雄性小鼠,实验分为对照组(0.9%生理盐水)、雷帕霉素处理组(按7.5mg/kg体重)、2个CdCl2处理组(分别按0.5和1mg/kg体重)、2个雷帕霉素与CdCl2联合处理组,共6组。实验给药采用腹腔注射方式,实验周期11天。HE染色和透射电镜分别观察脑组织学和超微结构变化,生化分析脑组织ROS、GSH、CAT水平变化,TUNEL染色评价脑神经细胞凋亡状态。结果显示：镉染毒小鼠脑颞叶皮层出现明显的混乱,海马区细胞排列松散,脑神经元线粒体肿胀和内嵴的断裂,而雷帕霉素能够明显削弱和保护这种改变。镉诱发脑组织ROS升高以及GSH含量和CAT活性降低,这被雷帕霉素明显改善。镉诱导大脑皮层和海马组织TUNEL阳性神经细胞数量增加也被雷帕霉素显著抑制。提示雷帕霉素可以通过抑制镉诱导小鼠脑组织神经细胞氧化应激发挥抗凋亡保护作用。
selleck化学药品液面控制 2雷帕霉素抑制镉诱导小鼠脑组织mTOR通路激活发挥抗凋亡保护作用 36只成年健康ICR雄性小鼠,实验分为对照组(0.9%生理盐水)、雷帕霉素处理组(按7.5mg/kg体重)、2个CdCl2处理组(分别按0.5和1mg/kg体重)、2个雷帕霉素与CdCl2联合处理组,共6组。实验给药采用腹腔注射方式,实验周期11天。免疫组化分析4E-BP1磷酸化表现,Western blot分析Akt、S6K1、4E-BP1和caspase-3蛋白表达。结果显示：免疫组化分析显示,镉染毒小鼠大脑皮层及海马CA1区磷酸化4E-BP1(Thr70)阳性细胞数量明显增加,Western PFTα供应商 blot分析展示镉诱导脑组织Akt、mTOR介导的S6K1和4E-BP1磷酸化以及cleaved-caspase-3增加,雷帕霉素明显地抑制这些信号分子改变。提示：雷帕霉素通过抑制镉诱导小鼠脑组织mTOR通路激活发挥抗凋亡保护作用。
内毒素休克(endotoxic shock)是临床危重病中常见的症状,可造成多器官损伤,其中以急性肺损伤(acute lung injury; ALI)常见,进一步可导致急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory
distress syndrome; ARDS)。内毒素休克所致肺损伤其发病机制复杂,治疗棘手,探讨其发病机制并进行合理有效地治疗仍是国内外研究的热点。 我们的前期研究结果表明,血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1, HO-1)在内毒素休克肺损伤时表达增多,可对肺起到一定的保护作用,明确其调节机制对临床制定预防措施具有重要意义。P38MAPK和细胞外信号调节激酶1/2(extracellular signal-regulated kinases, ERK1/2)信号通路是丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-Activated Protein kinase, MAPK)通路中的重要通路之一,是生物体内重要的信号转导分子,在细胞分化、凋亡及炎症等过程中起重要作用。有研究表明,人肾癌细胞内ERK的激活能诱导HO-1表达增多并抵抗细胞凋亡[2],也有研究发现,体外培养的血管平滑肌细胞内受到外界刺激时,可通过p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路诱导HO-1表达上调。至于P38MAPK和ERKl/2信号通路是否介导内毒素休克大鼠受损肺脏HO-1的表达,目前尚未见报道。本课题拟通过建立大鼠内毒素休克肺损伤模型并给予P38MAPK和ERK1/2通路的抑制剂来探讨P38MAPK和ERK1/2信号通路对内毒素休克大鼠受损肺脏内HO-1表达的影响。 第一部分：P38MAPK信号通路在内毒素休克诱发急性肺损伤大鼠肺组织中HO-1表达过程中的作用 目的探讨P38MAPK信号通路在内毒休克诱发急性肺损伤大鼠肺组织中HO-1表达过程中的作用。 方法清洁级雄性SD大鼠48只,体重180g～200g,采用随机数字表法,随机分为4组(每组12只)：对照组(C组)、内毒素休克组(LS组)、内毒素休克+抑制剂组(LSS组)和抑制剂组(B组)。C组和LS组股静脉输注0.1m1DMSO(二甲亚砜),LSS组和B组股静脉P38MAPK阻断剂SB2O35805μmol/kg(溶于0.1m110%二甲基亚砜)；30min后,C组和B组分别给予0.5ml生理盐水,LS组和LSS组分别给予LPS(脂多糖)10mg/kg(溶于0.