方法从新生大鼠海马分离神经干细胞(NSCs)体外培养,诱导分化7 d后收获新生神经细胞,分3组:Aβ25~35组的培养基中加入20

方法从新生大鼠海马分离神经干细胞(NSCs)体外培养,诱导分化7 d后收获新生神经细胞,分3组:Aβ25~35组的培养基中加入20μmol/L Aβ25~35处理12 h;Rb1+Aβ25~35组先在含10μmol/L Rb1的培养基中预处理24 hABT-199 价格后,再用20μmol/L Aβ25~35处理12 h;对照组不加任何其他处理因素。RT-PCR和免疫细胞化学法检测各组新生神经元的蛋白激酶/蛋白磷酸酯酶和磷酸化Tau蛋白的表达。结果Aβ25~35处理组与对照组相比,糖原合成ABT-263订单酶激酶-3β(GSK-3β)和细胞周期蛋白依赖性激酶5(CDK-5)的mRNA表达增加,蛋白磷酸酶2A(PP2A)的mRNA表达减少;荧光显微镜下,活化型GSK-3β(pY279,216)表达增加,PP2A表达降低;微管相关Roscovitine蛋白Tau(pS396)和Tau(pS262)的阳性细胞率明显增高。Rb1预处理可以显著降低Aβ25~35引起的上述蛋白激酶/蛋白磷酸酯酶和Tau改变。结论Aβ25~35诱导体外分化的新生大鼠神经细胞的蛋白激酶/蛋白磷酸酯酶系统失衡和Tau蛋白过度磷酸化,人参皂苷Rb1可减轻Aβ25~35引起的上述作用。

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