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“目的观察粉防己碱(tetrandrine,Tet)对增生性瘢痕成纤维细胞增殖及MEK/ERK、MKP-1信号通路的影响。方法培养增生性瘢痕成纤维细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、[3H]-TdR掺入率测定不同浓度Tet对细胞增殖的抑制作用;免疫沉淀法纯化蛋白并细胞外信号调节激酶(ERK)试剂盒测定ERK活性;Western-blot测定p-MEK1/2、p-ERKhttp://www.selleckchem.cn/products/abt-199.html1/2及蛋白激酶磷酸酶-1(MKP-1)表达。结果MTT实验、[3H]-TdR掺入率均显示Tet明显抑制细胞增殖,同时Tet明显抑制ERK活性,Western-blot显示Tet明显抑制p-MEK1/2及p-ERK1/2表达,同时提高MKP-1表达。结论粉防己碱明显抑制增生性瘢痕成纤维细胞增殖,机制与下调ERK活性,抑制MEK/ERK通路及上调MKPEPZ-6438浓度-1表达有关。”
“目的:建立丁酰胆碱酯酶(butyrylcholinesterase,BuChE)活性的高通量检测方法,用以筛选BuChE抑制剂及乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AchE)和BuChE的双重抑制剂。方法:人血浆以0.05μmol.L-1PBS稀释作为BuChE反应液,采用DTNB法检测BuChE活性。化合物selleck产品样品与酶反应液预孵30min,加入底物氯化丁酰巯基胆碱(BuSch)和显色剂5,5-二硫双硝基苯甲酸(DTNB),室温孵育60 min后,于412 nm检测吸收度。结果:通过对反应体系的优化,建立了可靠的筛选模型,并对76 730个样品进行筛选,得到22个具有良好量效关系的活性化合物,命中率0.029%。结论:建立了操作简单、反应灵敏、结果稳定的适用于高通量筛选的BuChE抑制剂体外筛选模型,并发现了一些具有较好活性的化合物。