方法用酶消化法分离24h内新生SD大鼠颅盖骨成骨细胞,进行原代培养。在培养液中加入淫羊藿甙(10ng/mL),作用于成骨细胞5mi

方法用酶消化法分离24h内新生SD大鼠颅盖骨成骨细胞,进行原代培养。在培养液中加入淫羊藿甙(10ng/mL),作用于成骨细胞5min、10min、30min、60min,抽提总蛋白,用Western blot法检测细胞中ERK、p-ERK、P38和p-P38蛋白的表达。用雌二醇(10-8mol/L)作用于成骨细胞5min、10min、30min,同上法检测细胞中ERK、p-已经ERK、P38和p-P38蛋白的表达。用淫羊藿甙(10ng/mL)、雌二醇(10-8mol/L)和u0126或SB203580单独或共同干预成骨细胞24h,抽提核蛋白,用Western blot法检测Cbfa1蛋白的表达。结果淫羊藿甙作用于成骨细胞,30min时可促进ERK蛋白的磷酸化,并可持续至60min,和空白组比较,差异有显著性(P<0.05更多);淫羊藿甙作用于成骨细胞,5min时即可促进P38蛋白的磷酸化,在30min时达高峰,并可持续至60min,和空白组比较,差异有显著性(P<0.05)。②雌二醇作用于成骨细胞,在30min时可促进ERK蛋白的磷酸化,和空白组比较,差异有显著性(P<0.05);雌二醇作用于成骨细胞,在10min时可促进P38蛋白的磷酸化,并可持续至30min,和空Duvelisib白组比较,差异有显著性(P<0.05)。③淫羊藿甙和雌二醇均能促进成骨细胞中Cbfa1蛋白的表达,和空白组相比,差异有显著性(P<0.05)。u0126和SB203580可以抑制淫羊藿甙和雌二醇促进Cbfa1蛋白表达的作用。结论淫羊藿甙和雌二醇均可以激活成骨细胞中ERK/MAPK和P38/MAPK信号通路;②淫羊藿甙和雌二醇均能促进成骨细胞中核转录因子Cbfa1的表达,并且ERK/MAPK和P38/MAPK信号通路参与了此过程。

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