与空白对照组和NC组相比,干扰LOXL2的表达后细胞中β-catenin和Cyclin D1的表达水平降低(P<0.05),Bax的表达水平升高(P<0.05)。结论 沉默LOXL2表达可在体外抑制卵巢癌细胞活力,诱导细胞凋亡,其作用机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。
Wortmannin
目的 探讨Ⅰ型胶原α1链(collagen type I alpha 1 chain,COL1A1)基因缺失是否抑制卵巢癌细胞的增殖。方法 构建COL1A1基因敲除的载体PX459-COL1A1,转染人卵巢癌ES-2细胞并用嘌呤霉素筛选,获得COL1A1敲除的或者ES-2细胞。用基因组测序方法检测COL1A1基因的编辑;细胞增殖、集落形成和细胞迁移实验检测COL1A1缺失对卵巢癌细胞增殖、集落形成及迁移的影响;细胞周期和细胞凋亡实验检测COL1A1缺失对卵巢癌细胞周期和凋亡的影响。裸鼠荷瘤模型体内实验研究COL1A1基因敲除Z-VAD-FMK对卵巢癌细胞增殖的影响。结果 Western blot和DNA测序结果显示CRISPR/Cas9方法可以编辑ES-2细胞的COL1A1基因,从而抑制COL1A1蛋白表达。COL1A1缺失显著抑制细胞增殖、软琼脂集落形成能力和细胞迁移(P<0.01)。此外,COL1A1缺失将卵巢癌细胞阻滞于G_2期(P<0.01),并促进细胞凋亡(P<0.01)。