方法用免疫组化方法检测10例正常宫颈组织、43例宫颈上皮内瘤变(CIN)和34例SCC组织中Skp2、P27Kip1蛋白的表达,用RT-PCR法对34例新鲜SCC组织进行Skp2 mRNA表达的检测。结果Skp2 mRNA在SCC呈过表达;Skp2蛋白表达在SCC发生过程中呈增高趋势;Skp2蛋白阳性率与淋巴结转移有关(P<0.05);COX分析表明,Skp2是一个独立的预后参数。PHydroxychloroquine浓度27Kip1蛋白在正常宫颈中表达最高,随病变进展表达呈下降趋势;P27Kip1蛋白阳性率与淋巴结转移相关(P<0.05);Skp2与P27Kip1表达呈显著负相关(P<0.01)。结论Skp2高表达和P27Kip1失活致细胞增殖周期失调在SCC发生过程中起重要作用,可作为SCC早期诊断、临床生物学行为和预后评价的新的参考指标。"
“为原核表达猪带绦虫腺苷酸JNK抑制剂激酶(ADK),对其免疫性进行初步研究,本研究以猪带绦虫成虫cDNA质粒文库中ADK同源基因重组质粒为模板,通过PCR扩增并将其亚克隆于原核表达载体pET28a(+),构建了pET-Ts-ADK重组质粒,经IPTG诱导表达,并通过SDS-PAGE鉴定,表明重组蛋白约30ku。经His-镍蛋白纯化柱纯化后western blot试验表明该重组蛋白可被猪带绦虫、LY294002亚洲带绦虫及牛带绦虫患者血清识别,表明猪带绦虫ADK基因在原核表达系统中表达获得的蛋白具有免疫反应性。”
“目的:观察一氧化氮(nitric oxide,NO)对人牙髓细胞生物学特性的影响。方法:利用组织块法培养人牙髓细胞,取生长良好的第3代细胞,在正常培养基与促矿化培养基中分别加入浓度为10μmol/L、50μmol/L和100μmol/L的NO供体亚硝基化合物-18(NOC-18),通过MTT检测细胞增殖能力,测定细胞ALP活性。